次氯酸钠消毒剂对人支气管上皮细胞的毒性效应
[背景]在不同的环境空气中存在着多种微生物,一旦易感人群与环境中的致病微生物接触,很容易被感染.为避免致病菌的传播,采取消毒的方式将环境中的致病菌杀死以阻断致病菌与人类接触,是目前最简单有效的办法.次氯酸钠(NaClO)是目前应用最广泛的消毒剂,然而NaClO应用于环境空气消毒的安全性尚不明确.
[目的]建立NaClO诱导支气管上皮细胞(BEAS-2B)损伤模型,探讨NaClO消毒剂对BEAS-2B细胞的毒性作用机制.
[方法]将 100 mmol·L-1 NaClO 标准溶液用 0.9%NaCl溶液梯度稀释至 0、25、50、100、200、400 μmol·L-1 处理细胞,分别在 15、30 min后细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活性,选择0、25、50 μmol·L-1 NaClO处理的细胞在倒置显微镜下观察细胞形态,流式细胞术 Annexin V FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,确定最终实验浓度.透射电镜观察线粒体等细胞器的形态,JC-1染色检测细胞线粒体膜电位,Fluo-4 AM荧光探针法检测细胞内Ca2+浓度,2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测细胞总活性氧(ROS),二氢乙锭(DHE)荧光探针检测细胞线粒体ROS,试剂盒检测脂质过氧化中间产物丙二醛(MDA).
[结果]与 0 μmol·L-1 NaClO处理组细胞相比,25 μmol·L-1 NaClO处理 30 min后细胞形态变化不大,50 μmol·L-1 NaClO处理 30 min后细胞活力下降至正常细胞活力的 70%(P＜0.01),细胞形态开始皱缩变圆,最终选择 50 μmol·L-1 NaClO处理 30 min作为后期实验浓度.实验结果发现,与 0 μmol·L-1 NaClO处理组细胞相比,NaClO处理组凋亡细胞数量增加(P＜0.05),线粒体膜电位降低(P＜0.01),细胞内Ca2+浓度升高(P＜0.05),细胞ROS水平升高(P＜0.05),线粒体ROS水平升高(P＜0.01),MDA含量升高(P＜0.01).
[结论]本研究成功建立了NaClO诱导BEAS-2B细胞损伤模型,并发现NaClO可通过诱导BEAS-2B细胞凋亡和氧化应激导致细胞损伤.根据结果推测可能的原因有 2种,一是NaClO溶于水形成次氯酸(HClO),HClO具有氧化性,进入细胞后使细胞内ROS水平升高,导致细胞氧化应激.二是HClO进入细胞直接攻击线粒体膜,导致线粒体膜内外电位失衡,Ca2+外流引起细胞凋亡.
消毒、次氯酸钠、人支气管上皮细胞、凋亡、氧化应激
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R11(卫生基础科学)
国家自然科学基金;国家自然科学基金;陕西省重点项目
2024-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
822-827,833
