妊娠期鱼藤酮暴露对大鼠胎盘糖原合成酶激酶-3β、β连环蛋白表达的影响
[背景]生物农药非靶标器官损伤研究备受关注,鱼藤酮暴露可能远超出职业环境,它可通过生物蓄积、果蔬残留等经口摄入方式增大妊娠期暴露机会,目前鱼藤酮对胎盘发育影响及发生机制尚不明确.[目的]探讨妊娠期鱼藤酮暴露通过胎盘屏障造成大鼠胎盘发育损伤及其对糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、β连环蛋白(β-catenin)表达水平的影响及其可能机制.[方法]选用无特定病原体(SPF)性成熟的SD雌性未孕大鼠18只,按随机数字法分为空白对照组(0.9％生理盐水)、玉米油组、鱼藤酮组(玉米油+2 mg·kg–1鱼藤酮),每组6只.另选雄性大鼠6只,夜间以3:1合笼交配,孕鼠妊娠全期(19 d)每天一次等体积灌胃,分别给予0.9％生理盐水、玉米油、2 mg·kg–1浓度鱼藤酮配制液,末次染毒后观察状态.次日麻醉孕鼠,超声检测胎盘大小及血流灌注情况,随后各组立即处死3只孕鼠剖取胎盘、脐带组织,其余9只孕鼠自然分娩,观测胎鼠发育情况并称重.苏木素-伊红染色观察脐带及胎盘组织病理变化;流式细胞仪检测胎盘组织活性氧水平;比色法检测胎盘组织Ca2+-ATP酶活力;免疫组织荧光化学法检测胎盘GSK-3β、β-catenin表达定位及水平;蛋白免疫印迹法(WB)检测胎盘组织p-GSK-3β-3β/GSK-3β-3β、p-β-catenin/β-catenin蛋白表达情况.[结果]孕鼠染毒期间均无受伤、死亡,鱼藤酮组发生吸收胎、分娩后死胎,胎鼠体重降低(P<0.05).B超显示各组胎盘呈圆盘状,中间厚边缘薄,胎儿面光滑,母体面粗糙,可见胎盘小叶,胎盘实质颗粒略粗,逗点状增强光点,绒毛膜板出现明显切迹,无钙化、退化、坏死.与玉米油组相比,鱼藤酮组胎盘胎儿面直径减小(P<0.05).多普勒彩超显示鱼藤酮组胎盘血流减少,空白对照组和玉米油组胎盘血流充盈.苏木素-伊红染色结果表明鱼藤酮组大鼠脐带组织平滑肌细胞排列松散,细胞核边界模糊,出现炎性浸润.胎盘底蜕膜的滋养层细胞体积较小,排列紊乱,出现核碎裂且胞质浑浊.组织活性氧水平鱼藤酮组高于其他两组(P<0.05);胎盘组织Ca2+-ATP酶活力在鱼藤酮组降低(P<0.05).免疫组织荧光法低倍镜观察出GSK-3β、β-catenin在胎盘中均有表达,底蜕膜层结构中均呈弱荧光表达,迷路层结构中均呈较强荧光表达;高倍镜下迷路层显示,与空白对照组和玉米油组相比,鱼藤酮组β-catenin荧光表达亮度降低(P<0.05),GSK-3β表达亮度增高(P<0.05).WB结果显示鱼藤酮组β-catenin、p-GSK-3β蛋白表达降低(P<0.01),GSK-3β蛋白表达升高(P<0.01),各组胎盘中p-β-catenin蛋白尚检测不出明显表达.[结论]妊娠期鱼藤酮暴露引起大鼠胎盘血流灌注不足、发育迟缓,发生氧化应激,β-catenin和p-GSK-3β蛋白表达下调,GSK-3β蛋白表达上调,可能进而造成孕鼠异常妊娠及胎鼠生长受限.
鱼藤酮、氧化应激、胎盘毒性、GSK-3β/β-catenin、超声检测
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R114(卫生基础科学)
宁夏自然科学基金项目2022AAC03171
2023-05-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
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