四种小鼠破骨细胞体外诱导培养方法的比较

摘要：

[目的]比较不同的破骨细胞体外诱导培养方法,为研究外源性因素对骨代谢影响提供方法学基础.[方法]采用骨髓基质细胞和骨髓单核细胞三维共育、骨髓基质细胞培养液转移刺激骨髓单核细胞、重组核因子-kB受体激活物配墓(RANKL)诱导骨髓单核细胞和RANKL诱导单核巨噬细胞株RAW264.7四种方法体外诱导破骨细胞.活细胞示踪剂CM-Dil标记RAW264.7后,用激光共聚焦显微镜扫描观察破骨细胞形成过程;抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法染色破骨细胞.[结果]四种方法均成功地诱导培养出由多个细胞互相融合的TRAP阳性多核破骨细胞.加入RANKL的方法诱导出的破骨细胞较大,数量也较多,方法简单.正常骨髓基质细胞诱导形成的破骨细胞形态较小,数量也相对较少,过程复杂,但可以用来研究干预因素作用于骨髓基质细胞后对破骨细胞分化的间接影响.在对照组及诱导培养体系中均可观察到一类不互相融合的TRAP阳性细胞,含1～3个核,TRAP染色多集中在胞核周围,此类细胞可能是尚未分化的破骨细胞前体.而互相融合的破骨细胞TRAP染色见于整个胞浆.[结论]各种破骨细胞体外诱导培养方法各有优势,应根据不同的实验目的选用不同的破骨细胞诱导培养方法.

关键词：破骨细胞、抗酒石酸盐磷酸酶(TRAP)染色、核因子-kB受体配基(RANKL)、骨髓基质细胞、小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)

所属期刊栏目：28

分类号：R114(卫生基础科学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30972467;江苏省自然科学基金资助项目BK2009120

在线出版日期：2011-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：556-560