10.3969/j.issn.1009-0460.2020.02.006
微小RNA?224对口腔鳞状细胞癌细胞侵袭迁移和KLLN表达的影响
目的 探讨微小RNA?224(miR?224)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞侵袭迁移和KLLN表达的影响.方法采用实时定量PCR(QPCR)检测正常口腔上皮细胞HOK和OSCC细胞(CAL?27、TSCCa和Tca8113)的miR?224水平,脂质体法向CAL?27细胞转染miR?224模拟物(Mimics组)或阴性对照序列(NC组),另以仅脂质体处理的细胞为对照组,活细胞计数(CCK?8)法、Transwell小室实验和划痕实验评估细胞增殖、侵袭和迁移能力,Western blotting检测KLLN、基质金属蛋白酶(MMP)?2和MMP?9的水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR?224对KLLN的靶向调控作用.结果QPCR结果显示,OSCC细胞的miR?224水平较HOK细胞下调(P<0.05),其中CAL?27细胞的miR?224水平最低.Mimics组的miR?224水平为12.325±1.250,高于对照组的1.003±0.058和NC组的1.029±0.072(P<0.05);Mimics组转染24、48 h后的增殖活力低于对照组和NC组(P<0.05);Mimics组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(23.161±3.609)%和(187.977±19.644)个,低于对照组的(47.372±4.717)%和(352.429±28.372)个及NC组的(45.094±5.651)%和(187.977±19.644)个,差异有统计学意义(P<0.05);Mimics组的KLLN、MMP?2和MMP?9水平低于对照组和NC组(P<0.05).对照组和NC组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05).MiR?224模拟物对载有突变型KLLN细胞的荧光素酶活性不产生影响,而抑制了野生型KLLN细胞的荧光素酶活性(P<0.05).结论OSCC细胞的miR?224水平降低且上调miR?224可能通过靶向KLLN来抑制OSCC细胞的迁移侵袭,该miRNA有望成为OSCC的预后生物标志物和治疗靶点.
口腔鳞状细胞癌、微小RNA?224、侵袭迁移、KLLN
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R739.8(肿瘤学)
2020-04-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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