LncRNA DLEU2对胃癌细胞增殖、凋亡和PI3K/Akt信号通路的影响

摘要：

目的 探讨长链非编码RNA淋巴细胞白血病缺失基因2(DLEU2)对胃癌细胞增殖、凋亡和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响.方法 通过GEPIA在线分析来自TCGA数据库和GTEx项目的胃癌组织DLEU2水平,采用实时定量PCR(QPCR)检测正常胃黏膜上皮GES?1细胞和胃癌BGC?823细胞的DLEU2水平;脂质体法将3条靶向DLEU2的小干扰RNA(si?DLEU2?1、si?DLEU2?2和si?DLEU2?3)转染至BGC?823细胞中,筛选最佳si?DLEU2干扰序列进行实验.体外常规培养BGC?823细胞并分为转染si?DLEU2的干扰组、转染无义siRNA序列的阴性对照(NC)组和未转染的空白对照(Blank)组,采用MTT比色法和AnnexinⅤ?FITC/PI双染流式细胞术检测细胞的增殖活力和凋亡率,QPCR和Western blotting检测凋亡相关因子Bcl?2、Bax和caspase?3的水平,Western blotting检测磷酸化的PI3K调节亚基p85(p?p85)和Akt(p?Akt)水平.结果 GEPIA在线分析显示胃癌组织的DLEU2水平高于正常组织(P<0.05);QPCR结果显示BGC?823细胞的DLEU2水平高于GES?1细胞(P<0.05),且3条si?DLEU2序列转染后,BGC?823细胞的DLEU2水平均降低(P<0.05),其中si?DLEU2?3序列的效果最佳,故选取si?DLEU2?3序列进行后续实验;干扰组的DLEU2水平及转染24、48 h后的增殖活力均低于Blank组和NC组(P<0.05).干扰组的凋亡率为(21.529±1.320)％,高于Blank组的(9.032±0.536)％和NC组的(8.641±0.365)％(P<0.05).与Blank组和NC组相比,干扰组的Bcl?2、p?p85和p?Akt水平降低,而Bax和caspase?3水平均升高(P<0.05).Blank组和NC组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05).结论 DLEU2在胃癌组织和细胞中均升高且发挥促癌作用,可能通过激活PI3K/Akt信号通路来增强细胞增殖能力并抑制凋亡,有望成为胃癌治疗的新靶点.

关键词：胃癌、淋巴细胞白血病缺失基因2、增殖、凋亡、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B通路

所属期刊栏目：25

分类号：R735.2(肿瘤学)

在线出版日期：2020-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：115-120