微小RNA-326靶向调控TWIST1表达及对肝癌细胞上皮间质转化的影响

摘要：

目的 探讨微小RNA-326( miR-326)对Twist同系物1( TWIST1)表达及肝癌细胞上皮间质转化( EMT)的影响.方法 采用实时定量PCR(QPCR)检测人正常肝细胞(LO2)和肝癌细胞(HepG2、SMMC-7721、BEL7402和MHCC-97H)中miR-326的表达量.脂质体法向SMMC-7721细胞分别转染miR-326模拟物(过表达组)和阴性对照序列( NC组),QPCR检测miR-326水平,活细胞计数CCK-8试剂盒检测增殖能力,划痕愈合实验和Transwell小室实验分别检测划痕愈合率和穿膜细胞数,双荧光素酶报告基因实验验证miR-326与TWIST1的靶向关系,QPCR和Western blotting检测EMT 相关因子的mRNA和蛋白水平.结果 与LO2细胞相比(1. 021±0. 072),肝癌细胞HepG2、SMMC-7721、BEL7402和MHCC-97H中miR-326的相对表达量显著下调(P＜0. 01).对照组、NC组和过表达组的miR-326水平依次为1. 012±0. 071、1. 032±0. 045和10. 752±0. 847,与其余两组相比,过表达组的 miR-326水平升高( P＜0. 05);过表达组转染24～48 h的增殖活性低于对照组和 NC 组( P＜0. 05);过表达组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(23. 119±2. 523)%和(107. 5±11. 6)个,低于对照组的(62. 158±3. 578)%和(215. 4±18. 4)个及NC组的(59. 473±4. 106)%和(229. 3±21. 5)个(P＜0. 05).与对照组和NC组相比,过表达组的波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白和TWIST1水平下降,而E-钙黏蛋白水平升高( P＜0. 05). miR-326抑制TWIST1野生型3′端非翻译区的荧光素酶活性(P＜0. 05),而对突变型的无影响(P＞0. 05).结论 肝癌细胞中miR-326表达下调,且过表达miR-326可抑制EMT,可能通过靶向TWIST1来发挥肿瘤抑制作用,该miRNA可作为潜在的肝癌诊疗靶点.

关键词：肝癌、微小RNA-326、上皮间质转化、迁移侵袭、Twist同系物1

所属期刊栏目：24

分类号：R735.7(肿瘤学)

在线出版日期：2019-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：684-689