微小RNA-423靶向调控BAP1表达及对肺鳞癌细胞增殖和凋亡的影响

摘要：

目的 探讨微小RNA-423(miR-423)对BRCA1相关蛋白1( BAP1)表达及肺鳞癌细胞NCI-H2170增殖和凋亡的影响.方法 采用miR-Pathway和Kaplan-Meier Plotter在线分析肺腺癌和肺鳞癌中miR-423的表达、调控信号通路及与预后的关系.脂质体法向NCI-H2170细胞分别转染miR-423模拟物(过表达组)和抑制物(抑制组),以未转染的细胞为对照组;采用实时定量PCR(QPCR)检测NCI-H2170细胞的miR-423水平,活细胞计数CCK-8试剂盒检测增殖情况,Annexin Ⅴ-FITC／PI双染流式细胞术检测凋亡情况,双荧光素酶报告基因实验验证miR-423与BAP1的靶向关系,Western blotting检测BAP1水平.结果 在线分析结果提示miR-423在肺腺癌中调控8条信号通路,在鳞癌中调控35条信号通路;与正常组织相比,miR-423在肺腺癌组织表达降低而在肺鳞癌中表达升高;miR-423水平与腺癌的预后无关,而仅与鳞癌的预后有关( HR＝0. 63,95%CI:0. 46～0. 87,P＝0. 004). QPCR结果显示与对照组(1. 024±0. 206)相比,过表达组的miR-423水平升高为3. 162± 0. 856,而抑制组降低为0. 215±0. 043,差异有统计学意义(P＜0. 05);与对照组相比,过表达组48、72 h的细胞增殖水平升高,而抑制组降低,差异有统计学意义(P＜0. 05).流式细胞术结果显示与对照组的(7. 352±1. 434)%相比,过表达组的凋亡率降低为(2. 851±0. 723)%,而抑制组的凋亡率升高为( 16. 028±4. 206)%,差异有统计学意义( P＜0. 05). miR-423模拟物可抑制BAP1野生型3′端非翻译区的相对荧光素酶活性,但对突变型BAP1的无影响;与对照组(0. 611± 0. 016)相比,过表达组的BAP1水平降低为0. 214±0. 054,而抑制组升高为0. 851±0. 074(P＜0. 05).结论 miR-423在肺鳞癌的发生发展中发挥促癌基因的作用,可以通过靶向BAP1来调控癌细胞的增殖并抑制凋亡,有望成为肺鳞癌诊断和新型生物治疗的靶点.

关键词：肺鳞癌、微小RNA-423、增殖、凋亡、BRCA1相关蛋白1

所属期刊栏目：24

分类号：R734.2(肿瘤学)

在线出版日期：2019-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：678-683