内皮祖细胞作为干扰素基因载体的体外抑瘤实验

摘要：

目的 研究用人骨髓诱导培养内皮祖细胞(EPCs)并以其作为免疫性基因载体治疗肿瘤的可行性.方法 采用梯度离心法从人骨髓中分离单个核细胞,加入人血管内皮生长因子(VEGF165)诱导培养,用流式细胞仪测定细胞表面标志CD133、KDR和CD34的表达情况.以增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)作为报告基因,用流式细胞仪检测携带EGFP基因的腺病毒载体(Ad-EGFP)对EPCs的感染效率.携带人干扰素γ(hγIFN)基因的腺病毒载体(Ad-hγIFN)感染EPCs(EPCshγIFN),ELISA法检测细胞EPCs-hγIFN分泌hγIFN的情况.将EPCs-hγIFN与肺癌细胞株H460、胃癌细胞株SGC7901、大肠癌细胞株LoVo混合培养,观察EPCs-hγIFN对肿瘤细胞的作用.结果 经过诱导培养2周后,贴壁的单核细胞开始表达CD133、KDR和CD34.Ad-EGFP的感染复数(MOI)为150pfu/EPCs时,感染率达90％以上.EPCs-hγIFN培养上清可以测得浓度稳定且高水平的hγIFN,第1天上清液中的hγIFN浓度为1305.28pg/ml,第14天为1419.10pg/ml.EPCs-hγIFN与H460、5GC7901、LoVo细胞株混合培养4天,肿瘤细胞的生长受到明显的抑制,肿瘤细胞存活率分别为(77.87±6.50)％、(79.36±4.35)％和(69.52±3.78)％,均显著低于对照组(P＜0.05).结论 携带hγIFN目的基因的腺病毒转染EPCs后基因表达情况良好,体外实验中表现为抑制肿瘤细胞的生长,可作为免疫性基因载体开展进一步的研究.

关键词：内皮祖细胞、干扰素、肿瘤、腺病毒

所属期刊栏目：17

分类号：R73-3(肿瘤学)

在线出版日期：2012-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：682-685