医院获得性肺炎患者耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分离株耐药基因及毒力因子研究

摘要：

目的 分析医院获得性肺炎患者耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)分离株的耐药基因和毒力因子.方法 选取2021年1月至2022年12月安阳市人民医院收治的96例医院获得性肺炎患者为研究对象,分离得到100株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分离株.采用微生物鉴定仪和药敏检测法鉴定其菌种,统计分析患者的临床资料(包括性别、年龄、科室、基础性疾病、标本类型、ICU入住情况、侵袭性操作情况、抗生素暴露情况及预后情况等);采用优化的Hodge法、碳青霉烯酶灭活法和拉丝实验对菌株进行表型检测;采用PCR检测19种β-内酰胺类(碳青霉烯酶、AmpC酶和ESBL)和喹诺酮类耐药基因和毒力基因,选取阳性产物并通过双向测序鉴定其基因型;采用多位点序列分析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的流行病学,采用脉冲场凝胶电泳分析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的克隆情况.结果 本研究100株肺炎克雷伯菌进行体外药敏试验表明,其头孢菌素类、酶抑制剂类、单环类和碳青霉烯类抗生素的耐药率最高,均在95.0％以上,氨基糖苷类抗生素和替加环素的耐药率均较低,均在60.0％左右.分布最广的科室是ICU.菌种主要来源于痰液,其次是血液和尿液.采用优化的Hodge试验进行表型检测检出84阳性菌株,而采用mCIM法检出93株阳性菌株.对耐药基因进行扩增结果表明,NDM、KPC、SHV、IMP、TEM、CTX-M和qnrS 7条基因均可扩增出相应位置大小的阳性条带,而SME、VIM、GIM、GES、OXA-23、OXA-48、VEB、PER、DHA、AAC、qnrA和qnrB这12种耐药基因均未扩增出相应的条带.从中随机选取20株KPC阳性DNA产物进行测序,经序列比对发现其均为KPC-2基因型,而NDM阳性DNA产物经测序比对发现4株为NDM-1基因型,2株为NDM-5基因型.经多序列比对发现NDM-5和NDM-1基因有两处基因发生变异.携带4种不同耐药基因的菌株占比最多(53.0％),其次是携带5种(24.0％)和携带3种(16.0％)不同耐药基因的菌株,采用拉丝试验发现有11株是阳性的.对其荚膜型毒力基因进行检测,发现有11种毒力基因,其中ureA、wabG、fimH、entB和ybtA的检出率均较高(＞90.0％),而rmpA基因检出率为20％,仅1株检出wcaG基因.对上述11种毒力基因检测发现携带6种(36.0％)和7种(32.0％)毒力基因的菌株较多,有3株肺炎克雷伯菌具有10种毒力基因.结论 耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌抗菌耐药性较严重,有创操作和抗生素暴露是导致病区流行耐药菌的主要原因.其耐药机制是菌株具有表达IMP-4、NDM和KPC碳青霉烯酶,ST11是为本院CRKP的主要ST型,ICU病区是菌株克隆的主要病区之一,且检出诸多毒力基因.

关键词：医院获得性肺炎、肺炎克雷伯菌、碳青霉烯酶、耐药基因、毒力因子

所属期刊栏目：44

分类号：R378;R978.1;R446.5

在线出版日期：2024-09-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：21-25