微小RNA-29b在肾小管上皮细胞的表达及调节上皮间质转分化的作用机制

摘要：

目的 研究血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)中微小核糖核酸(miRNA)-29b(miR-29b)表达的影响,以及miR-29b在细胞间质转分化中的作用,为研究肾间质纤维化机制提供新思路.方法 体外培养NRK-52E,将不加入AngⅡ的细胞作为对照组,加入AngⅡ的细胞为实验组,按加入不同浓度的AngⅡ(109 mol/L、107 mol/L)及AngⅡ刺激时间(12 h、24 h、48 h)的长短又分为实验亚组,同时设立miR-29b mimic转染组及阴性对照组.显微镜下观察对照组与实验组细胞的形态学改变,运用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-29b表达,蛋白质免疫印迹试验检测Snail、E钙黏附素(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)蛋白表达.两两比较用t检验.结果 实验组中AngⅡ刺激12 h后,细胞形态呈梭形改变;随着AngⅡ刺激浓度的增加,α-SMA、Snail蛋白表达显著升高,E-cadherin表达量显著下降,与对照组相比,差异均有统计学意义(P＜0.05).实验组中随着AngⅡ刺激时间的延长,细胞α-SMA、Snail和E-cadherin的表达呈时间依赖性,α-SMA、Snail的表达显著增加,E-cadherin表达量显著降低,与对照组相比,P＜0.05.向时AngⅡ呈浓度和时间依赖性下调NRK-52E细胞中miR-29b表达,与对照组相比,P＜0.05.此外,miR-29b mimic转染组和阴性对照组相比,α-SMA、Snail蛋白表达显著降低(P＜0.05),E-cadherin表达量显著升高(P＜0.05).结论 AngⅡ可诱导NRK-52E细胞发生间质转分化,且miR-29b可抑制AngⅡ诱导的NRK-52E细胞发生间质转分化.

关键词：miR-29b、上皮间质转化、血管紧张素Ⅱ、肾小管上皮细胞

所属期刊栏目：16

分类号：R69;R73

资助基金：湖北省自然科学基金2013CFB227

在线出版日期：2016-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：427-431