10.3969/j.issn.1671-4695.2023.15.003
miR-1299通过靶向调控CCND1对非小细胞肺癌细胞增殖、转移和凋亡的影响
目的 探讨miR-1299通过靶向调控细胞周期蛋白D1(CCND1)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、转移和凋亡的影响.方法 回顾性收集2021年1月至2022年1月入青岛大学附属青岛市中心医院胸外科行原发性NSCLC手术的患者29例,取癌组织和癌旁正常肺组织,培养人正常肺上皮细胞16HBE和NSCLC细胞系H1299、A549、PC-9、H1975、SPC-A1,RT-qPCR法检测组织和细胞中miR-1299和CCND1的表达,取生长良好的H1299细胞,将其分为对照组(转染 miR-control)、miR-1299 NC 组(转染 miR-1299 NC)、miR-1299 mimic 组(转染 miR-1299 mim-ic)、miR-1299 inhibitor 组(转染 miR-1299 inhibitor)、PCDNA 组(转染 pcDNA3.1-NC)、PCDNA-CCND1 组(转染pcDNA3.1-CCND1 真核表达载体)、miR-1299 mimic+PCDNA 组(共同转染 miR-1299 mimic 和 pcDNA3.1-NC)和miR-1299 mimic+PCDNA-CCND1 组(共同转染 miR-1299 mimic 和 pcDNA3.1-CCND1 真核表达载体).检测各组细胞增殖、迁移、凋亡、CCND1蛋白的表达及miR-1299与CCND1的靶向关系.结果 癌组织中miR-1299的相对表达明显低于癌旁正常肺组织,癌组织中CCND1的相对表达明显高于癌旁正常肺组织,差异均有统计学意义(P<0.05).NSCLC细胞系H1299、A549、PC-9、H1975、SPC-A1中miR-1299的相对表达明显低于人正常肺上皮细胞16HBE,NSCLC细胞系H1299、A549、PC-9、H1975、SPC-A1中CCND1的相对表达明显高于人正常肺上皮细胞16HBE,差异均有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,miR-1299 mimic组H1299细胞增殖和迁移能力明显降低,凋亡能力明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);而miR-1299 inhibitor组H1 299细胞增殖和迁移能力明显升高,凋亡能力明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05).miR-1299 mimic组的CCND1-WT的荧光素酶活性明显低于miR-1299 NC组,与miR-1299 NC组相比,miR-1299 mimic组中CCND1蛋白表达明显下调,差异均有统计学意义(P<0.05).miR-1299和CCND1呈负相关(r=-0.535,P=0.003).与PCDNA组相比,PCDNA-CCND1组H1299细胞增殖和迁移能力明显升高,凋亡能力显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与miR-1299 mimic+PCDNA组相比,miR-1299 mimic+PCDNA-CCND1组H1299细胞增殖和迁移能力明显升高,凋亡能力明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 在NSCLC组织和细胞中,miR-1299表达降低,CCND1表达升高,过表达miR-1299可能通过靶向抑制CCND1表达,抑制NSCLC细胞的增殖、转移和促进其凋亡.
非小细胞肺癌、miR-1299、CCND1、增殖、转移、凋亡
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R734.2;R285.5;R979.1
国家自然科学基金82072927
2023-09-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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