P-Rex2a干扰PTEN-long对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

摘要：

目的 探讨P-Rex2a干扰PTEN-long对胃癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 回顾性选取2018年1月至12月在上海市第八人民医院行胃癌根治术患者的胃癌组织和癌旁组织(距离癌组织5 cm)病理标本30例;收集胃癌细胞系BGC-823、AGS、MGC-803和SGC-7901,采用qRT-PCR检测胃癌和癌旁组织和细胞中PTEN-long mRNA的表达;将SGC-7901细胞处于对数生长期时进行实验,实验分为对照组(SGC-7901细胞未转染慢病毒)、NC组(SGC-7901细胞转染空白质粒)、PTEN-long-RFP组(将PTEN-Long-RFP转染到的SGC-7901细胞)、si-NC组(转染siP-Rex2a NC)、siP-Rex2a 组(siRNA 干扰技术对 Rex2a 进行沉默)和 siP-Rex2a+PTEN-long 组(将 PTEN-long-RFP和siP-Rex2a共同转染到的SGC-7901细胞).采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫共沉淀(Co-IP)检测P-Rex2a与PTEN-long相互作用,蛋白质印迹法检测SGC-7901细胞中PI3K活性相关蛋白;构建P-Rex2a干扰表达载体,检测siP-Rex2a对细胞增殖和凋亡的影响.结果 胃癌组织中PTEN-long mRNA水平显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.05);胃癌细胞系BGC-823、AGS、MGC-803、SGC-7901中mRNA明显低于胃上皮细胞GES-1,差异均有统计学意义(P＜0.05).与对照组和NC组相比,PTEN-Long-RFP组中的胃癌细胞SGC-7901 增殖明显降低,凋亡能力显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).P-Rex2a与PTEN-long可以相互作用,P-Rex2a过表达可以增强P-Rex2a与PTEN-long的结合;当P-Rex2a蛋白水平随着时间增加时,PTEN-long的蛋白水平逐渐降低.培养后48～96 h,与对照组和si-NC组相比,siP-Rex2a组中的胃癌细胞SGC-7901增殖明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);与对照组和si-NC组相比,siP-Rex2a组中的胃癌细胞SGC-7901凋亡能力显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与对照组和si-NC组相比,siP-Rex2a组中的P-Akt、P-PI3K、Bcl-2显著降低,Caspase3、PARP、Bax、Bad明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).培养后48～96 h,与对照组和si-NC组相比,siP-Rex2a组中的细胞增殖率明显降低;与siP-Rex2a组相比,siP-Rex2a+PTEN-long组中培养后48～96 h的细胞增殖率显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与对照组和si-NC组相比,siP-Rex2a组中的细胞凋亡率明显升高;与siP-Rex2a组相比,siP-Rex2a+PTEN-long组中的细胞凋亡率显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 PTEN-long参与胃癌的发生和发展,干扰P-Rex2a可以促进PTEN-long表达从而抑制胃癌细胞SGC-7901增殖,促进其凋亡,有望成为胃癌潜在治疗的新靶标.

关键词：胃癌、P-Rex2a、PTEN-long、细胞增殖、细胞凋亡

所属期刊栏目：21

分类号：R735.2;R3;R543.5

资助基金：上海市卫生健康委员会支持项目17ZR1405600

在线出版日期：2023-02-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2581-2587