microRNA-124通过Sp1控制人血管平滑肌细胞表型转换影响颅内动脉瘤发展的机制

摘要：

目的 探究微小RNA-124(miR-124)通过特异性β1糖蛋白(Sp1)控制人血管平滑肌细胞(HVSMC)表型转换影响颅内动脉瘤(IA)发展的机制.方法 HVSMC进行原代培养,HVSMC在5％胎牛血清的生长培养基SmGM-2(Lonza)中于37℃在加湿的5％CO2培养箱中培养.根据研究方案将HVSMC细胞分为对照组、miR-124模拟转染组和miR-124-pCMV-Sp1Mut共转染组.通过定量RT-PCR分析HVSMC在血小板源生长因子(PDGF-BB)刺激后miR-124表达.通过BrdU检测和刮擦试验检测HVSMC的增殖迁移.通过荧光素酶报告基因测定检测miR-124与Sp1的靶向关系.通过蛋白印迹分析HVSMC标记基因和Sp1的蛋白表达.结果 与0 h相比,PDGF-BB(20 ng/mL)诱导后第6、12、24 h HVSMC中miR-124表达降低,差异有统计学意义(P<0.05).miR-124模拟转染组细胞增殖和细胞迁移能力较对照组增强,差异均有统计学意义(P<0.05).miR-124模拟转染组与Sp1-WT3'-UTR融合的荧光素酶活性较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05),而miR-124模拟转染组与Sp1-MUT的3'-UTR融合的荧光素酶活性与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05).miR-124模拟转染组α-SMA、SM22a、calponin和MYH11蛋白表达较对照组升高,miR-124-pCMV-Sp1Mut共转染组α-SMA、SM22a、calponin和MYH11蛋白表达较miR-124模拟转染组降低,差异均有统计学意义(P<0.05).miR-124模拟转染组Sp1蛋白表达较对照组降低,miR-124-pCMV-Sp1Mut共转染组Sp1蛋白表达较miR-124模拟转染组升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 miR-124通过Sp1调节HVSMC的表型并显著抑制IA发展,miR-124对Sp1表达的调节可能为miR-124的功能脑血管疾病的分子机制提供新的见解.

关键词：微小RNA-124、特异性β1糖蛋白、血管平滑肌细胞、表型转换、颅内动脉瘤

所属期刊栏目：21

分类号：R735.3;R543.3;R329.24

资助基金：河北省医学科学研究课题计划项目20220560

在线出版日期：2022-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1915-1919