10.3969/j.issn.1671-4695.2022.02.008
lncRNA RPL34-AS1调控miR-670-5p/SMAD4对胃癌细胞生物学行为的影响
目的 探讨lncRNA RPL34-AS1对胃癌细胞生物学行为的影响及其对miR-670-5p/SMAD4分子轴的调控作用.方法 回顾性收集2018年5月至2019年6月期间临沂市肿瘤医院收治的33例胃癌患者的癌组织及其癌旁组织标本.QRT-PCR检测RPL34-AS1、miR-670-5p的表达量,蛋白质印迹法检测SMAD4表达.体外培养人胃癌细胞HGC-27,实验分组:pcDNA组(转染RPL34-AS1过表达载体的阴性对照)、pcDNA-RPL34-AS1组(转染RPL34-AS1过表达载体)、anti-miR-NC组(转染miR-670-5p特异性寡核苷酸抑制剂的阴性对照)、anti-miR-670-5p组(转染miR-670-5p特异性寡核苷酸抑制剂)、pcDNA-RPL34-AS1+miR-NC组(共转染pcDNA-RPL34-AS1与阴性对照mimic NC序列)、pcDNA-RPL34-AS1+miR-670-5p组(共转染pcDNA-RPL34-AS1与miR-670-5p寡核苷酸模拟物).MTT与平板克隆形成实验检测细胞增殖与克隆形成数,流式细胞术检测细胞凋亡率,划痕实验与Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告基因实验检测RPL34-AS1与miR-670-5p的靶向关系,以及miR-670-5p与SMAD4的靶向关系.结果 与癌旁组织比较,胃癌组织中RPL34-AS1和SMAD4的表达量降低,miR-670-5p的表达量升高,差异均有统计学意义(P<0.05).过表达RPL34-AS1或抑制miR-670-5p表达后,SMAD4表达量升高,细胞活力降低,集落形成数和侵袭细胞数减少,迁移距离减小,细胞凋亡率升高,差异均有统计学意义(P<0.05).RPL34-AS1可靶向调控miR-670-5p,miR-670-5p可靶向调控SMAD4;而miR-670-5p过表达可逆转RPL34-AS1过表达对细胞生物学行为的作用.结论 LncRNA RPL34-AS1过表达可通过调控miR-670-5p/SMAD4而抑制胃癌细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭及诱导细胞凋亡.
胃癌;lncRNA RPL34-AS1;miR-670-5p;SMAD4;增殖;迁移;侵袭
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山东省医学科技发展计划项目2019060162
2022-02-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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