紧密连接蛋白Occludin表达与小鼠肠屏障功能障碍和炎性出血的关系

摘要：

目的 探讨紧密连接蛋白Occludin表达与小鼠肠屏障功能障碍和炎性出血的关系.方法 以15只C57BL/6新生小鼠为研究对象,通过交替饮用3％葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液和去离子水建立炎症性肠病模型,并根据实验设置分为对照组(正常小鼠+腹腔注射生理盐水)、模型组(模型小鼠+腹腔注射生理盐水)和Occludin转染组(模型小鼠+腹腔注射50μL Occludin过表达慢病毒载体).注射1周后通过蛋白印迹分析各实验组小鼠体内紧密连接蛋白Occludin的表达.通过酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒分析提取组织中促炎细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β的水平.通过异硫氰酸荧光素-葡聚糖(FITC-D)方法和血液中脂多糖(LPS)的浓度评估小鼠的肠屏障功能.通过免疫组织化学对小鼠肠组织进行评分.通过比较小鼠结肠长度与体重比评估结肠发育.通过逆转录聚合酶链式扩增(RT-PCR)实时分析凋蛋白p53、Bax和Bcl-2的mRNA表达.结果 模型组较对照组中Occludin的蛋白表达降低(P<0.05),Occludin转染组较模型组Occludin的蛋白表达升高(P<0.05).模型组较对照组中TNF-α、IL-6和IL-1β的水平升高(P<0.05),Occludin转染组较模型组TNF-α、IL-6和IL-1β的水平降低(P<0.05).模型组较对照组中FITC-D和LPS升高(P<0.05),Occludin转染组较模型组FITC-D和LPS降低(P<0.05).模型组较对照组中组织学评分和粪便出血评分升高(P<0.05),Occludin转染组较模型组相应评分降低(P<0.05).模型组较对照组结肠长度与体重之比值降低(P<0.05),Occludin转染组较模型组比值升高(P<0.05).模型组较对照组p53、Bax的mRNA表达升高,Bcl-2表达降低(P<0.05),Occludin转染组较模型组Bax的mRNA表达降低,Bcl-2表达升高(P<0.05).结论 紧密连接蛋白Occludin的过表达减轻了DSS引起的小鼠肠黏膜损伤,促进体内肠道形态和肠屏障完整性的更新.

关键词：小鼠;紧密连接蛋白Occludin;肠屏障;免疫组织化学;炎性出血

所属期刊栏目：20

资助基金：海南省自然科学基金编号:2018619527

在线出版日期：2021-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1908-1912