环氧-二十碳三烯酸通过抑制线粒体分裂抑制肺气肿

摘要：

目的 研究环氧-二十碳三烯酸(EET )对慢性阻塞性肺病(COPD )肺气肿的影响和对线粒体动态变化的调节作用,探讨肺气肿和线粒体分裂的关系,进一步阐明EET对肺气肿的抑制作用及其相关分子机制.方法 ①采用野生型C57BL/6小鼠(WT小鼠)和Ephx2基因敲除小鼠(Ephx2-/-小鼠),随机分为吸入过滤空气组和熏烟组,每周暴露到相应的环境中5 d,每天1 h,熏烟16周建立COPD模型.造模结束后取小鼠肺组织,病理切片HE染色观察肺气肿严重程度;电子显微镜观察线粒体动态变化;肺组织匀浆提蛋白检测线粒体动态调控蛋白Drpl和MFN、自噬调控蛋白PINK1的表达水平.②采用人支气管上皮细胞(Beas-2B细胞系),用香烟烟雾提取物(CSE )刺激24 h建立模型,外源性加入14,15 -EET( 1 pmol/L)(功能最强的EET亚型),研究14,15-EET对Drpl、PINKl和Parkin的作用.结果 ①与空气组比较,熏烟组小鼠出现明显的肺气肿[( 96.38 ±39.01 )μm vs.( 29.18 ±16.6 )μm;( 57.53 ±17.81 )μm vs.( 25.13±10.12 )μm],差异有统计学意义(P ＜0.05 ),而且Ephx2-/-小鼠的肺气肿程度较WT小鼠减轻[( 57.53 ±17.81 )μm1 vs.( 96.38 ±39.01)μm],差异有统计学意义(P ＜0.05).②与空气组比较,熏烟组小鼠肺组织上皮细胞内线粒体分裂明显增加[(5.33 ±2.52 )μm vs.( 15.33 ±5.03 )μm;( 10.33 ±1.53 )μm vs.( 16.33 ±4.73)μm],差异有统计学意义(P＜0.05 ),而Ephx2-/-小鼠的线粒体分裂水平较WT小鼠减轻[(10.33 ±1.53 )μm vs.( 5.33 ±2.52 )μm ],差异有统计学意义(P ＜0.05 ).③熏烟造成小鼠肺组织线粒体分裂蛋白Drpl表达水平升高(0.29 ±0.22 vs.0.18 ±0.06 ),融合蛋白MFN2表达下讲(0.03±0.01vs.0.13 ±0.01 ),线粒体自噬调节蛋白PINK1 的表达升高(0.25 ±0.04 vs.0.14 ±0.028 ),差异有统计学意义(P ＜0.05 ).④CSE刺激Beas - 2B细胞后,外源性加入14,15 - EET能够抑制Drpl、PINK1和Parkin的表达(1.97 ±0.43 vs.3.21 ±0.56,0.84 ±0.07 vs.2.01 ±0.20,1.24 ±0.13 vs.1.87 ±0.27 ),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ①EET可能通过抑制线粒体分裂减轻肺气肿;②其分子机制可能为抑制线粒体分裂调节蛋白Drpl.

关键词：小鼠、慢性阻塞性肺病、环氧-二十碳三烯酸、肺气肿、线粒体分裂、Drpl

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资助基金：首都医科大学附属北京友谊医院"种子计划"人才项目;北京市青年骨干个人项目

在线出版日期：2021-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：225-229