磷脂酸通过LPAR1/Akt途径诱导黄韧带肥大的损伤机制研究

摘要：

目的 探究磷脂酸通过溶血磷脂酸受体1(LPAR1)/丝苏氨酸蛋白激酶(Akt)途径诱导黄韧带肥大的损伤机制研究.方法 回顾性选择2019年10月至2020年3月于宝鸡市中医医院接受腰椎管狭窄症减压椎板切除术30例患者的黄韧带组织样本为观察组,另选同期接受了类似手术的无腰椎管狭窄症的30例患者作为对照组,免疫组化分析组织样本中LPA和LPAR1的表达,蛋白印迹分析胶原蛋白Ⅰ和胶原蛋白Ⅲ的表达.将黄韧带细胞分为3组,即黄韧带细胞组(不进行任何处理)、LPA处理组(10μmol/L的LPA)和LPAR1抑制组(10μmol/L的LPA+终浓度50μmol/L的LPAR1抑制剂),干预12 h和36 h后,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞的活力及增殖;干预24 h后,膜联蛋白V-APC和碘化丙啶染色并使用流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时聚合酶链式反应(RT-PCR)分析各组细胞中Caspase 3、Bax、Bcl-2的mRNA表达;蛋白印迹法分析Akt、Cdk1和Cyclin-B1蛋白表达.结果 观察组较对照组LPA和LPAR1的表达升高(P<0.05).观察组较对照组Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的蛋白表达升高(P<0.05).LPA处理组较黄韧带细胞组细胞增殖升高(P<0.05),LPAR1抑制剂组较LPA处理组细胞增殖降低(P<0.05).LPA处理组较黄韧带细胞组细胞活力升高(P<0.05),LPAR1抑制剂较LPA处理组细胞活力降低(P<0.05),LPA处理组较黄韧带细胞组细胞凋亡降低(P<0.05).LPA处理组较黄韧带细胞组Caspase 3、Bax、Bcl-2的mRNA表达降低(P<0.05),LPAR1抑制剂较磷脂酸处理组Caspase 3、Bax、Bcl-2的mRNA表达升高(P<0.05).LPA处理组较黄韧带细胞组P-Akt、Cdk、Cyclin的表达升高(P<0.05),LPAR1抑制剂组较LPA处理组P-Akt、Cdk、Cyclin的表达降低(P<0.05).结论 LPA-LPAR1-Akt的激活与黄韧带细胞的增殖和存活密切相关,LPAR抑制剂对磷脂酸化黄韧带细胞的细胞活力和增殖具有抑制作用,并通过促进凋亡相关蛋白的表达和抑制磷酸化途径蛋白的表达对黄韧带肥大损伤发挥治疗作用.

关键词：黄韧带肥大、磷脂酸、LPAR1/Akt、抑制剂、磷酸化

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资助基金：陕西省重点研发计划项目编号:S2020-YF-YBSF-0587

在线出版日期：2020-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2610-2614