西妥昔单抗体外增强人鼻咽癌细胞对紫杉醇化疗敏感性的实验研究

摘要：

目的 观察西妥昔单抗(C225)体外增强人鼻咽癌CNE-1细胞对紫杉醇(PTX)化疗敏感性作用,并探讨可能的作用机制.方法 将人鼻咽癌CNE-1细胞株随机分为对照组、PTX组、联合用药组,PTX组采用30μg/ml PTX处理,联合用药组采用30μg/ml PTX+250μg/ml C225处理,对照组加入等体积的二甲基亚砜(DMSO).MTT法检测细胞的PTX耐药性,取对数期的CNE-1细胞分为9组,4组分别加入浓度为0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L的PTX;另有4组也加入PTX,同时加入C225,使C225最终浓度为250μg/ml,空白对照组中加入等体积的DM-SO,培养48 h.MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期分布,Western blotting、RT-PCR分别检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、BCL2-相关X蛋白(Bax)蛋白水平及其基因相对表达量.结果 PTX组CNE-1细胞抑制率为(15.99±2.13)％,联合用药组CNE-1细胞抑制率为37.10％(37.10±2.48)％,差异有统计学意义(t=11.184,P=0.000).与对照组相比,PTX组、联合用药组的细胞凋亡率、G0～G1期细胞比率均升高(P<0.05),而S期细胞比率降低(P<0.05).与PTX相比,联合用药组的细胞凋亡率、G0～G1期细胞比率升高(P<0.05),S期细胞比率与M期细胞比率均明显降低(P<0.05).MTT检测PTX耐药性结果显示,空白对照组、C225组细胞的细胞活性随着PTX浓度增加而降低,空白对照组、C225组CNE-1细胞的PTX IC50分别为4.179μmol/L、0.25μmol/L.与对照组相比,PTX组、联合用药组CyclinD1、Bcl-2蛋白水平与基因相对表达量均明显降低(P<0.05),而Bax蛋白水平与基因相对表达量均明显升高(P<0.05).与PTX相比,联合用药组CyclinD1、Bcl-2蛋白水平与基因相对表达量均明显降低(P<0.05),而Bax蛋白水平与基因相对表达量均明显升高(P<0.05).结论 在PTX化疗的基础上增加C225处理,可以促进PTX对人鼻咽癌CNE-1细胞的增殖抑制作用以及促凋亡作用,降低细胞的CNE-1细胞的PTX IC50,增强CNE-1细胞对PTX敏感性.

关键词：人鼻咽癌CNE-1细胞、西妥昔单抗、紫杉醇、细胞增殖、细胞凋亡

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资助基金：湖北省教学研究基金资助项目编号:2016231

在线出版日期：2020-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1287-1291