RNA干扰抑制高迁移率族蛋白1表达对子宫内膜癌细胞株HEC-1A的增殖抑制作用及对细胞周期和细胞凋亡的影响

摘要：

目的 探讨通过RNA干扰阻滞高迁移率族蛋白1(HMGB1)的表达水平对子宫内膜癌(EC)细胞株HEC-1A中的细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响.方法 将细胞分为以下三组:空白对照组(HEC-1A细胞未感染)、阴性对照组(HEC-1A细胞感染无关序列)、干预组(慢病毒转染HEC-1A细胞).通过Western blot法对三组HEC-1A细胞中的HMGB1蛋白表达水平进行检测,并采用实时荧光定量PCR对HMGB1 mRNA相对表达量进行检测.采用MTT法对HEC-1A细胞增殖情况进行检测,用流式细胞术对HEC-1A细胞周期变化进行检测,同时用Annexin V-FITC/PI法对HEC-1A细胞凋亡情况进行检测.采用Western blot法对转染HMGB1-siRNA后细胞cyclinD1、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)及磷酸化Akt(pAkt)蛋白表达进行检测.结果 相比空白对照组与阴性对照组,干预组HEC-1A细胞中HMGB1蛋白表达水平显著下降(P<0.01).经实时荧光定量PCR检测结果可知相比空白对照组与阴性对照组,干预组HEC-1A细胞中HMGB1 mRNA相对表达量显著下降(P<0.01).相比空白对照组、阴性对照组,干预组cyclinD1和pAkt蛋白表达显著下降(P<0.01);而三组Akt蛋白表达水平的比较,并无显著差异(P>0.05).相比空白对照组、阴性对照组,干预组HEC-1A细胞在570 nm波长处的吸光度值显著下降(P<0.01).干预组HEC-1A细胞G0/G1期比率在整个细胞周期分布中的比率最高,其较空白对照组、阴性对照组显著升高(P<0.01);干预组HEC-1A细胞S期比率、G2/M期比率较空白对照组、阴性对照组显著下降(P<0.01).干预组HEC-1A细胞凋亡比率较空白对照组、阴性对照组显著升高(P<0.01).结论 HMGB1表达降低可有效阻滞EC细胞株HEC-1A的增殖,使得细胞于G0/G1期受阻,同时可有效促进细胞凋亡,其作用机制可能在于降低cyclinD1蛋白表达和干扰磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路.

关键词：子宫内膜癌、高迁移率族蛋白1、HEC-1A细胞、细胞增殖、细胞凋亡

所属期刊栏目：18

资助基金：新疆医科大学科研创新基金项目XJC2012138

在线出版日期：2019-09-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1831-1834