干扰miR-21调控人前列腺癌 细胞株PC-3增殖、迁移及侵袭的实验研究

摘要：

目的 观察干扰微小RNA-21(miR-21)对人前列腺癌细胞株PC-3增殖、迁移及侵袭的影响,并初步探讨其调控机制.方法 收集对数期生长PC-3细胞株及人前列腺正常上皮细胞株RWPE-1,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测并对比其miR-21基因表达情况.取对数期生长PC-3细胞株,采用脂质体转染法将miR-21抑制剂(inhibitor)及NC inhibitor质粒转染至PC-3细胞,分别设为干扰组和空载组,另取不做处理PC-3细胞为空白组.采用倒置荧光显微镜检测转染效率;采用MTT法检测并对比各组不同时刻吸光度(OD值);采用划痕试验及Transwell试验检测并对比三组穿膜细胞数及迁移率;采用RT-PCR法检测并对比三组miR-21、基质金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因表达水平;采用蛋白免疫印迹法检测并对比三组TIMP3、MMP-9蛋白表达水平.结果 PC-3细胞miR-21相对表达量显著低于RWPE-1细胞(P<0.05);倒置显微镜下检测转染24 h后干扰组和空载组转染效率分别为(82.16±8.20)％、(80.23±8.69)％;干扰组MTT实验不同时刻OD值均显著低于空白组和空载组(P<0.05),空白组与空载组比较,差异均无统计学意义(P>0.05),三组MTT实验OD值均随时间延长呈显著升高趋势(P<0.05);干扰组12 h、24 h迁移率均显著低于空白组和空载组(P<0.05),空白组与空载组比较,差异均无统计学意义(P>0.05),三组24 h迁移率显著高于12 h(P<0.05);干扰组穿膜细胞数显著少于空白组和空载组(P<0.05),空白组与空载组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);干扰组miR-21相对表达量、MMP-9 mRNA和蛋白相对表达量显著低于空白组和空载组(P<0.05),空白组与空载组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);干扰组TIMP3 mRNA和蛋白相对表达量显著高于空白组和空载组(P<0.05),空白组与空载组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 前列腺癌细胞miR-21异常高表达,干扰miR-21可抑制人前列腺癌细胞株PC-3增殖、迁移及侵袭能力,可能与上调TIMP3 mRNA和蛋白、下调MMP-9 mRNA和蛋白有关.

关键词：前列腺癌、微小RNA-21、增殖、迁移、侵袭

所属期刊栏目：18

在线出版日期：2019-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1379-1383