外源性PTEN基因对人肺癌细胞株SPC-A-1增殖、凋亡及侵袭的影响实验

摘要：

目的 观察外源性第10号染色体同源缺失磷酸酶和张力蛋白(PTEN)基因对人肺癌细胞株SPC-A-1增殖、凋亡及侵袭的影响,并初步探讨其调控机制.方法 取对数期SPC-A-1细胞转染重组腺病毒Ad-PTENGFP、Ad-GFP,分别设为PTEN组、空载组,并检测转染效率,另取不做处理为对照组.MTT法检测并对比各组细胞增殖情况;Hoechst 33342荧光染色法检测细胞凋亡情况;Transwell试验检测细胞侵袭能力;分别采用实时荧光定量PCR法、蛋白免疫印迹法检测并对比各组细胞中PTEN mRNA和蛋白、粘着斑激酶(FAK)、蛋白激酶B(AKT)mRNA表达情况及p FAK/FAK、p AKT/AKT.结果 FACS法检测重组腺病毒Ad-PTEN-GFP、Ad-GFP对SPC-A-1细胞转染效率分别为(82.41±5.46)％、(83.02±6.20)％.PENT组MTT试验不同时刻OD值显著低于对照组和空载组(P ＜0.05),3组OD值均随时间延长呈显著升高趋势(P ＜0.05);Hoechst 33342荧光染色发现,对照组和空载组细胞形态正常,呈弥散均匀荧光,PTEN组部分细胞核浓染,呈月牙形聚集、颗粒状荧光碎片,PENT组细胞凋亡率显著高于对照组和空载组(P ＜0.05);PENT组细胞侵袭数目显著少于对照组和空载组(P ＜0.05);对照组和空载组OD值、凋亡率及细胞侵袭数目比较差异均无显著性(P＞ 0.05);与对照组和空载组比较,PENT组PENT mRNA和蛋白相对表达量显著较高(P ＜0.05),p AKT/AKT、p FAK/FAK显著较低(P ＜0.05);对照组和空载组PENT mRNA和蛋白相对表达量、p AKT/AKT、p FAK/FAK、3组AKT、FAK mRNA相对表达量比较差异均无显著性(P＞ 0.05).结论 外源性PTEN基因可显著抑制SPC-A-1细胞增殖及侵袭,促进其凋亡,推测与抑制AKT/FAK信号通路有关.

关键词：肺癌、第10号染色体同源缺失磷酸酶和张力蛋白基因、增殖、凋亡、侵袭

所属期刊栏目：18

资助基金：恩施自治州科研项目资助[2018]19号-14

在线出版日期：2019-06-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：590-594