PKCα对AngⅡ作用的心肌成纤维细胞增殖活性和NO分泌的影响

摘要：

目的 探讨蛋白激酶Cα(PKCα)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用后的心肌成纤维细胞增殖活性和一氧化氮(NO)分泌的影响.方法 分离培养乳鼠心肌成纤维细胞,分为对照组(正常培养)、AngⅡ组(AngⅡ处理)、实验组(PKCα抑制剂D4681和AngⅡ处理).实时定量PCR和Western blot法测定细胞中的PKCα mRNA和蛋白水平.用PKCα抑制剂和AngⅡ共同处理心肌成纤维细胞,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定细胞增殖活性,硝酸还原法测定细胞分泌的NO水平,酶联免疫吸附(ELISA)法测定培养液中的诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)含量,羟脯氨酸法测定细胞合成胶原蛋白水平,Western blot法测定各组细胞表达基质金属蛋白酶－1(MMP－1)、基质金属蛋白酶－2(MMP－2)、Ⅰ型胶原(COLLⅠ)、Ⅱ型胶原(COLLⅡ)水平.结果 AngⅡ组心肌成纤维细胞中的PKCα mRNA和蛋白水平均明显高于对照组(P ＜0.05).AngⅡ组心肌成纤维细胞增殖活性升高,细胞分泌的NO含量和iNOS活性均下降,细胞合成胶原蛋白水平升高,细胞中的MMP－1、MMP－2蛋白水平下降,COLLⅠ、COLLⅡ蛋白水平升高,与对照组相比差异具有统计学意义(P ＜0.05).实验组心肌成纤维细胞增殖活性降低,细胞分泌的NO含量和iNOS活性升高,胶原蛋白合成减少,细胞中MMP－1、MMP－2蛋白表达增多,COLLⅠ、COLLⅡ蛋白表达减少,与AngⅡ组相比差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 PKCα在AngⅡ作用后的心肌成纤维细胞中表达升高,抑制PKCα可以减弱AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖作用,促进细胞分泌NO.

关键词：心肌成纤维细胞、蛋白激酶Cα、增殖活性、一氧化氮

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在线出版日期：2018-10-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2165-2169