10.3969/j.issn.1671-4695.2018.17.017
Bax对过氧化氢作用后的血管内皮细胞MDA生成及内皮素释放影响研究
目的 研究Bcl-2相关X蛋白(Bax)对过氧化氢(H2O2)作用后的血管内皮细胞丙二醛(MDA)生成及内皮素(ET)释放的影响.方法 血管内皮细胞分为对照组、si-NC组、si-Bax组、H2O2组、si-NC组+H2O2组、si-Bax+H2O2组共6组,对照组:不做任何处理,常规培养;si-NC组:血管内皮细胞中转染siRNA Control,常规培养;si-Bax组:血管内皮细胞中转染siRNA Bax,常规培养;H2O2组:血管内皮细胞不做转染,用100μmol/L的H2O2处理;si-NC+H2O2组:血管内皮细胞中转染siRNA Control后24 h,用100μmol/L的H2O2处理;si-Bax+H2O2组:血管内皮细胞中转染siRNA Bax后24 h,用100μmol/L的H2O2处理.qRT-PCR和Western blot测定细胞中Bax mRNA和蛋白的表达水平.在血管内皮细胞中转染Bax小干扰RNA和小干扰RNA阴性对照,用H2O2处理后,硫代巴比妥酸法检测各组培养液中MDA含量,Griess法测定各组培养液中一氧化氮(NO)含量,二硝基苯肼法测定各组培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,放射免疫法测定各组培养液中ET含量,流式细胞术测定各组细胞凋亡情况.结果 H2O2组细胞中Bax mRNA和蛋白水平高于对照组.si-Bax组细胞中Bax mRNA和蛋白水平低于对照组.si-NC组细胞中Bax mRNA和蛋白水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).H2O2组细胞培养液中MDA、LDH、ET水平均升高,NO水平下降,细胞凋亡率升高,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05).si-Bax+H2O2组细胞培养液上清中的MDA、LDH、ET水平有所降低,NO水平升高,细胞凋亡率有所降低,与H2O2组相比,差异具有统计学意义(P<0.05).si-NC+H2O2组细胞清中的MDA、LDH、ET、NO水平及细胞凋亡率与H2O2组相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 H 2 O2诱导血管内皮细胞氧化损伤,而下调Bax表达可以减少血管内皮细胞释放MDA、ET、LDH,促进细胞中NO合成,减少细胞凋亡,Bax可以减弱H2O2诱导的血管内皮细胞损伤.
血管内皮细胞、Bax、丙二醛、内皮素、氧化损伤
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2018-09-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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