siRNA沉默Drp1对鱼藤酮诱导的帕金森病模型细胞自噬和凋亡的影响

摘要：

目的 探究siRNA沉默动力相关蛋白1(Drp1)后对鱼藤酮诱导的帕金森病模型细胞自噬以及细胞凋亡的影响.方法 体外培养人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,用1μm、5μm、10μm、20μm鱼藤酮进行处理24 h、48 h,MTT法检测细胞抑制情况.将细胞分为鱼藤酮最佳浓度处理组(20μm鱼藤酮处理,损伤组)、阴性转染组(损伤组基础上转染Drp1阴性序列)、Drp1siRNA处理组(损伤组基础上转染Drp1 siRNA)、Drp1抑制剂组(损伤组基础上添加Mdivi-1试剂)、自噬促进剂组(损伤组基础上添加雷帕霉素).观察各组线粒体自噬情况、细胞线粒体功能相关蛋白(Mfn2、Drp1、NRF1)、自噬相关蛋白(Beclin-1、LC3、P62)、凋亡蛋白(Bcl-2、Bax)表达情况和细胞凋亡情况.结果 与对照组相比,鱼藤酮处理组细胞抑制率均升高,随着浓度以及培养时间的增加,细胞抑制率逐渐增加(P<0.05).损伤组、阴性转染组、自噬促进剂组LC3II定位在细胞线粒体,且细胞线粒体结构受损,外周出现自噬双层膜.与Drp1 siRNA转染组、Drp1抑制剂组相比,损伤组、阴性转染组、自噬促进剂组Drp1、LC3II、Beclin-1、Bax蛋白表达和细胞凋亡率升高,Mfn2、NRF1、P62、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05).结论 Drp1参与鱼藤酮诱导帕金森病细胞线粒体自噬,沉默Drp1用.可降低鱼藤酮诱导帕金森病细胞线粒体自噬以及细胞凋亡,具有保护作.

关键词：帕金森病模型细胞、动力相关蛋白1、鱼藤酮、自噬、凋亡、siRNA沉默技术后

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资助基金：国家自然科学基金81501088,81372821;广东省医学科研基金201512774940574;广东省重大神经疾病诊治研究重点实验室2014B030301035;华南神经疾病早期干预及功能修复研究国际合作基地2015B050501003;广州市重大神经系统疾病临床医学研究与转化中心201604020010

在线出版日期：2018-07-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

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