10.3969/j.issn.1671-4695.2017.24.001
血小板衍生因子促进血管内皮细胞血管化的实验研究
目的 探讨血小板衍生因子(PDGF-BB)促进血管内皮细胞血管化意义.方法 体外培养新生SD大鼠肾脏血管内皮细胞、鉴定血管内皮细胞.取第4代细胞按2×104/ml接种于96孔板,用溶解的PDGF-BB蛋白稀释为5 ng/ml、10 ng/ml、15 ng/ml、20 ng/ml、25 ng/ml、30 ng/ml的浓度梯度干预血管内皮细胞24 h,用CCK-8测定PDGF-BB蛋白对血管内皮细胞的毒性.取第4代细胞按2×104/ml接种于培养皿,随机分成4组(n=10):对照组(不加因子培养组)、加PDGF-BB因子培养12 h组、加PDGF-BB因子培养24 d组、加PDGF-BB因子培养48 d组.应用荧光实时定量聚合酶链反应(Q-PCR)和Westem blot检测各组血管内皮前体细胞EPC中VEGF mRNA和蛋白的表达情况.结果对照组(不加因子培养组)、加PDGF-BB因子培养12 h组、加PDGF-BB因子培养24 h组、加PDGF-BB因子培养48h组VEGF/磷酸甘油醛脱氢酶灰度比值平均分别为0.375 ± 0.004、0.613 ± 0.004、0.661 ± 0.005、0.845 ± 0.002,4个组两两比较差异均有统计学意义(P <0.05).荧光RT-PCR检测4组VEGF基因表达结果显示:对照组表达量最低(0.240 ± 0.006),培养48 h组最高(3.646 ± 0.023),4组之间两两比较差异均有统计学意义(P <0.05).结论 PDGF-BB能促进血管内皮细胞血管化VEGF因子分泌和VEGF表达的上调,并在形态上发生血管化的变化.
血管内皮细胞、血管化、PDGF-BB蛋白、VEGF蛋白
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R3 ;R96
国家自然科学基金资助项目编号81560350
2018-01-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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