10.3969/j.issn.1671-4695.2017.23.003
不同强度低频脉冲电磁场对小鼠MC3T3-E1成骨样细胞增殖、分化及矿化影响
目的 探究不同强度低频脉冲电磁场(LFPEMFs)对小鼠成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响.方法 将MC3T3-E1成骨样细胞分成4组,实验取材分为2个时间点.常规培养环境下分别接受频率一定(0.15Hz),强度不同(1.10mT,3.10mT,4.10mT)脉冲磁场刺激;不接受任何磁场刺激组作为对照组.细胞处理24h后行细胞毒性检测(CCK8);细胞处理14 d后行碱性磷酸酶(ALP)染色、骨钙素(OCN)酶联免疫吸附测定(ELISA),Runt相关转录因子2(RUNX 2)的蛋白免疫印迹(WB)实验;对处理21 d后的4组细胞行茜素红(Alizarin red)染色、骨钙素ELISA检测和I型胶原(Cola I)WB实验.结果 MC3T3-E1成骨样细胞接受不同强度LFPEMFs处理24h后没有发现毒性反应,各组CCK 8的OD值差异无统计学意义(P>0.05).MC3T3-E1细胞接受不同强度LFPEMFs处理14 d后,ALP、OCN、RUNX 2表达与对照组相比明显增强(P<0.05),随着强度的递增蛋白表达也相应增加(P<0.05);ALP表达随着磁场强度增大而增加(P<0.05),数量最多出现在4.10mT组中(P<0.05);LFPEMFs促进OCN的分泌(P<0.05)并呈现强度依赖性(P<0.05);随着磁场强度的增加,RUNX 2蛋白表达增加(P<0.05).处理21 d后,LFPEMFs提升MC3T3-E1成骨样细胞的矿化能力,随着磁场强度的增加,矿化结节数量相应增多(P<0.05),最大数量出现在4.10mT组中(P<0.05);同时OCN的表达随着磁场强度的增加而增加(P<0.05),并出现浓度依赖性(P<0.05);Cola I的的表达随着磁场强度的增强而增加(P<0.05),表达峰值出现在4.10mT中(P<0.05).结论 固定频率脉冲电磁场在1.10~4.10mT的强度下对小鼠MC3T3-E1细胞的增殖能力无明显影响,但能促进细胞成骨分化及矿化能力,并呈现磁场强度依赖性,这为临床上干预骨折愈合、抗骨质疏松等治疗提供实验依据.
成骨样细胞株、低频脉冲磁场、骨代谢、Ⅰ型胶原、骨钙素
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G80;R71
2018-01-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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