10.3969/j.issn.1671-4695.2016.21.002
MiR -451a 对前列腺癌细胞迁移侵袭能力的影响
目的:研究 miR -451a 在人前列腺癌组织中的表达情况,探讨 miR -451a 是否通过下调 LMP7来影响雄激素非依赖性前列腺癌细胞系(DU145)细胞的增殖和侵袭能力。方法收集37例前列腺癌组织标本及40例良性前列腺增生组织标本,通过实时荧光定量 PCR(RT - PCR)检测各组组织中与前列腺癌相关的 miR -451a、miR -28、miR -51、miR -157、miR -48、miR -137、LMP7mRNA 的表达情况,Pearson 相关分析检验 miR -451a 表达量与 LMP7的相关性;免疫印迹试验( Western blot)分别检测两组 LMP7的表达情况。进一步在细胞实验中,通过转染 miR -451a mimic和 miR - NC 至离体培养的 DU145细胞中,随后,Western blot 检测 DU145细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、钙粘附蛋白 E(E - cadherin)的表达情况,划痕试验和 Transwell 法观察细胞迁移侵袭情况,利用荧光素酶试验验证 LMP7是 miR -451a 的靶基因;紧接着通过转染过表达 LMP7的质粒至 DU145细胞,检测 DU145细胞中相应蛋白的表达情况,划痕试验和 Transwell 法观察细胞迁移侵袭情况。结果相比于前列腺增生组织,miR -451a 在前列腺癌组织中的表达降低( P<0.01);而 miR -28、miR -51、miR -157、miR -48、miR -137的表达在两组之间无显著差异;前列腺癌组织中 LMP7 mRNA 的表达增加( P <0.01);MiR -451a 与 LMP7 mRNA 的表达量呈负相关( r =-0.4708,P <0.01)。在体外细胞实验中,相比于 miR - NC 组,转染 miR -451a mimic 后,DU145细胞中 VEGF、E - cadherin、LMP7的表达减少( P <0.05),DU145细胞的迁移侵袭能力下降( P <0.01);荧光素酶试验结果显示,miR -451a 能够降低 LMP7-3ˊ- UTR 质粒的荧光素活性( P <0.05);转染过表达 LMP7质粒后,相比于 miR -451+空质粒组,DU145细胞中 VEGF 和 E - cad-herin 表达增加( P <0.05),细胞的迁移侵袭能力得到部分恢复( P <0.01)。结论在前列腺癌组织中,miR -451a 低表达;MiR -451a 通过下调 LMP7抑制 DU145细胞的迁移和侵袭。
前列腺癌、miR-451a、LMP7、增殖侵袭
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R73;R3
2016-12-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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2076-2081