NADPH氧化酶抑制剂对高糖刺激大鼠近端肾小管上皮细胞中内质网应激的作用机制探讨

摘要：

目的 探讨在有或无还原型烟酰胺腺嘌呤核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶抑制剂存在的条件下,高糖刺激大鼠近端肾小管上皮细胞中内质网应激蛋白GRP78及凋亡蛋白caspase-12表达的变化,从细胞和分子水平探讨糖尿病肾病中氧化应激和内质网应激的相互作用机制.方法 大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E)培养,使用高糖(30 mmol/L)DMEM培养基刺激NRK52E细胞24 h,荧光显微镜检测细胞内活性氧ROX的产生量,Western-blot检测细胞内内质网应激蛋白GRP78及凋亡蛋白Caspase12的表达;并且使用NADPH氧化酶抑制剂DPI(10 μM)预处理细胞,并观察其对细胞内ROX产生及GRP78和Caspase12蛋白的表达影响.结果 高糖刺激24 h可明显增加细胞内ROS的产生,为正常对照组的2.5倍(P<0.05).NADPH氧化酶抑制剂 DPI(10 μΜ)预处理后,高糖诱导的细胞内ROS产生明显受到抑制,较高糖刺激刺激组降低了43.69%(P<0.05).高糖刺激NRK52E细胞24 h后可,细胞内内质网应激蛋白GRP78蛋白表达显著上调,为正常对照组的5倍(P<0.05).与正常对照组相比,高糖刺激组NRK52E细胞凋亡相关蛋白caspase12的表达也显著增加(P< 0.05).NADPH氧化酶抑制剂DPI(10 μΜ)预处理后并高糖刺激NRK52E细胞24 h,与高糖刺激组相比,DPI处理组NRK52E细胞内质网应激蛋白GRP78表达显著下调(P<0.05),凋亡相关蛋白caspase12的表达显著下调(P<0.05).结论 高糖刺激大鼠近端肾小管上皮细胞后,细胞内发生氧化应激与内质网应激反应,并且氧化应激可能作为上游信号诱导细胞内内质网应激反应的发生,并最终导致细胞凋亡的发生.

关键词：大鼠、高糖刺激、氧化应激、内质网应激、NADPH氧化酶

所属期刊栏目：12

分类号：O62;R36

资助基金：2010年度深圳市科技计划项目201003014

在线出版日期：2013-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1090-1093