中国人Brugada综合征SCN5A基因突变K317N的初步功能分析

摘要：

目的 继在一个中国人Brugada综合征家系发现了SCN5A基因突变K317N并进行了载体构建之后,为进一步研究Brugada综合征发病的离子、细胞电生理机制,对新的SCN5A基因突变(K317N)进行初步的功能表达鉴定与分析.方法 用脂质体转染法建立稳定表达pGFP-IRES-hβ1质粒的293细胞系,并用G418进行筛选鉴定.然后,分别做pRc/CMV-hH1(hH1)和携带有基因突变K317N的pRc/CMV-hH1(mhH1)的瞬时转染表达.采用全细胞膜片钳技术记录钠通道电流.实验结果由pClamp软件分析.结果 通过G418的抗生素筛选和荧光鉴定,成功地培养出稳定表达hβ1的293细胞系.在未转染质粒的空白细胞对照中,没有发现钠电流.在瞬时转染野生型的hH1的细胞系中,记录到了明显的钠电流,在瞬时转染突变型K317N的细胞系中,没有发现钠电流.结论 野生型hH1所表达的钠通道蛋白与正常心肌细胞钠通道电生理特性相似.而突变型K317N的表达则由于突变所造成的氨基酸的改变对心脏电压依赖钠通道蛋白α亚基的关键结构P环产生了影响,钠通道未能正常表达,或者导致细胞上正常钠通道数量的大量减少,这可能是导致在突变型未能记录出钠电流的原因.

关键词：Brugada综合征、SCN5A、转染、全细胞膜片钳、钠通道动力学

所属期刊栏目：10

分类号：R5 ;S43

在线出版日期：2011-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1655-1658