10.3969/j.issn.1671-4695.2010.07.003
昆明种小鼠胚胎干细胞的分离、培养与鉴定
目的 探讨昆明种小鼠胚胎干细胞的分离、培养和鉴定.方法 收集小鼠14~16 d胚龄的囊胚,以小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,形成的胚胎干细胞(ES)细胞样集落,分离隆起生长的胚胎内细胞团并继续培养,观察集落的生长状态,通过碱性磷酸酶染色进行的分析鉴定,并对其体外分化能力进行检测.结果 共培养收集74个昆明小鼠的囊胚,其中有53个囊胚的内细胞团(ICM)离散程度较强;ES细胞集落的特征呈鸟巢状,其细胞圆小,细胞核大,排列紧密,边缘清晰,细胞之间的界限不清楚;碱性磷酸酶(AKP)染色呈阳性,集落呈红棕色或蓝色,成纤维细胞或分化细胞呈淡黄色或无色;体外悬浮培养时,ES细胞集落能够形成简单拟胚体,且Ebs外向性生长,周围分化的细胞形态成多样性.结论 昆明小鼠是我国应用最多的实验小鼠,建立昆明小鼠的ES细胞系有利于其转基因动物的获得,能够为我国的科研工作更好地服务.
昆明小鼠、胚胎干细胞、分离、培养、鉴定
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R38;R32
2010-05-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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