血清HBV-DNA模板不同提取方法的比较和选择

摘要：

目的 比较直接煮沸法、碱裂解法、浓缩碱裂解法和碱裂解3倍量提取法四种提取法提取样本核酸的差异;选择简便、可靠的检测乙肝病毒DNA(HBV-DNA)提取方法.方法 运用中山医科大学达安基因股份有限公司生产的HBV-DNA试剂盒中推荐的浓缩碱裂解法,与直接煮沸法、碱裂解法、碱裂解3倍量提取法,分别提取血清样本核酸模板,用美国MJ实时荧光定量PCR仪检测HBV-DNA,对结果进行对比分析.结果 共89例乙肝表面抗原(HBsAg)阳性患者血清,浓缩碱裂解法和碱裂解3倍量提取法检测,两者均有62例HBV-DNA阳性(＞1 000拷贝/ml定性为阳性)阳性率69.6%,阳性拷贝/ml均值用对数形式表示分别为(6.652±1.301)和(6.601±1.282),两者间结果无明显差异(P＞0.05);直接煮沸法检测出47例阳性(均在上述62例中)阳性率52.8%;碱裂解法测出57例阳性(均在上述62例中)阳性率64.0%,阳性拷贝/ml均值与浓缩碱裂解法和碱裂解3倍量提取法相比较,阳性检出率较低,有非常显著性差异(P＜0.01)和显著性差异(P＜0.05).结论 碱裂解3倍量提取法操作简单,省时、省材料,重复性好,阳性检出率与浓缩碱裂解法一致,建议使用碱裂解3倍量提取法检测HBV-DNA.

关键词：HBV-DNA模板、直接煮沸法、碱裂解法、浓缩碱裂解法、碱裂解3倍量提取法

所属期刊栏目：9

分类号：R44;TS2

在线出版日期：2010-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：40-41,43