小干扰RNA抑制缺氧诱导因子1α表达对食管鳞癌细胞增殖和迁移的影响
目的 初步探讨在乏氧培养条件下重组腺相关病毒(rAAV)介导的靶向缺氧诱导因子1α(HIF-1α)小干扰核糖核酸(siRNA)对KYSE150人食管鳞癌细胞增殖和迁移的影响.方法 首先构建rAAV介导的以HIF-1α为靶基因的RNA干扰表达载体,即rAAV-siHIF-hrGFP.将rAAV-siHIF-hrGFP及rAAV-hrGFP分别转染对数生长的KYSE150细胞,在乏氧培养条件下模拟肿瘤细胞的乏氧环境进行培养,应用荧光定量聚合酶链反应(Real-Time PCR)、蛋白质印迹法(Western Blot)、3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法和Transwell侵袭实验法,观察KYSE150细胞HIF-1αmRNA和蛋白水平的表达及KYSE150细胞增殖和迁移的影响.本实验共分3组:①对照组(Wt)组;②rAAV-hrGFP组,即空载病毒组(Cv组);③rAAV-siHIF-hrGFP组,即干扰病毒组(Si组).结果 在乏氧培养条件下,rAAV-siHIF-hGFP能够抑制KYSE150细胞HIF-1αmRNA和蛋白的表达,HIF-1α蛋白测定(灰度比):Wt组1.121±0.038、Cv组1.098±0.023、Si组0.426±0.020,与Si组比较差异均有统计学意义(P＜0.01);同时能够抑制KYSE150细胞增殖和迁移,细胞增殖(A值):Wt组1.276±0.077、Cv组1.312±0.073、Si组0.621±0.053,与Si组比较差异均有统计学意义(P＜0.01);但rAAV-hrGFP对KYSE150细胞增殖、迁移及HIF-1α的表达未见有明显影响.结论 在乏氧培养条件下,利用rAAV介导的siRNA技术抑制HIF-1α的表达,可有效抑制KYSE1 50细胞体外增殖和迁移.
食管肿瘤、缺氧诱导因子1、α亚基、细胞增殖、细胞迁移
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R735.1(肿瘤学)
2013-01-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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