原位杂交检测HPV DNA在尖锐湿疣诊断中的应用

摘要：

@@尖锐湿疣(Condyloma acuminatum CA)是由人乳头状瘤病毒(HPV)感染所致的一种性传播疾病［1］，近年来，该病在我国发病呈明显上升趋势。目前尖锐湿疣的病理学诊断主要依赖形态学改变，本文应用原位杂交方法检测石蜡包埋组织中HPV DNA，观察其在尖锐湿疣诊断中的意义和敏感性。
1 材料与方法
选取我科由妇科送检标本蜡块31例，患者年龄21～48岁，平均30.1岁。其中18例临床初诊为尖锐湿疣者，9例诊为假性湿疣或疣样病变。经病理诊断分为两组，尖锐湿疣组22例，假性湿疣者组9例。标本经福尔马林固定，石蜡包埋，切片。
HPV DNA原位杂交技术检测：HPV6/11型地高辛标记探针,原位杂交试剂盒购自北京中山生物技术有限公司。具体步骤为：①5μm石蜡切片贴附于涂有非蛋白性防脱片胶的玻片上，65℃烤干，常规脱蜡入水。②0.01M PBS浸洗3次，每次5分钟,20μg/ml蛋白酶K消化20分钟，经0.2N HCl浸泡10分钟后，PBS清洗，室温干燥。③每张切片滴加含HPV6/11型探针杂交液20μl,加盖盖玻片，放入50%甲酰胺湿盒中，95℃变性10分钟，10℃水中复性10分钟，42℃温箱杂交过夜。④缓冲液洗掉未结合探针，滴加碱性磷酸酶标记抗地高辛抗体，室温2小时。⑤缓冲液浸洗，NBT-BCIP显色1～12小时。

机标关键词：原位杂交检测、尖锐湿疣、诊断、石蜡包埋组织、假性湿疣、人乳头状瘤病毒、地高辛标记探针、原位杂交方法、石蜡切片、抗地高辛抗体、缓冲液、性传播疾病、形态学改变、探针杂交、送检标本、室温、生物技术、碱性磷酸、技术检测、患者年龄

所属期刊栏目：16

分类号：R75(皮肤病学与性病学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共1页

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