人IFN-β重组慢病毒的制备及对肺癌细胞增殖的影响

摘要：

目的 构建人β干扰素(IFN-β)基因重组慢病毒,体外转染人肺癌A549细胞,观察IFN-β基因的表达及其对A549细胞的增殖抑制作用.方法 通过聚合酶链反应(PCR)获得人IFN-β基因,克隆到慢病毒载体,通过转染293细胞包装制备慢病毒液,并体外感染A549细胞,采用RT-PCR及Western Blot检测IFN-β基因在A549细胞中的表达情况.应用MTS法检测转染后对A549细胞增殖的影响.结果 IFN -β基因重组质粒经酶切后电泳结果显示能得到与理论大小相符的片段,基因测序结果与GenBank序列完全一致,重组质粒经鉴定正确,转染293细胞获得病毒滴度为3×107 PFU/ml,体外感染A549细胞后,RT-PCR、Western Blot检测IFN-β表达水平明显增高,并可明显抑制A549细胞增殖.结论 本研究成功构建IFN-β基因重组慢病毒,体外感染后能够稳定表达并抑制A549细胞增殖,为应用IFN-β基因治疗肺癌奠定初步基础.

关键词：人β干扰素、慢病毒载体、基因转染、A549、细胞

所属期刊栏目：18

分类号：R37;S85

资助基金：国家自然科学基金30901476

在线出版日期：2013-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：683-686