结核分枝杆菌PPE19的克隆及其GST融合蛋白的表达和鉴定

摘要：

目的 构建结核分枝杆菌PPE19的GST融合蛋白表达载体,并鉴定其在大肠杆菌中的表达.方法 以结核杆菌H37Rv基因组为模板,根据PPE19基因序列设计引物,运用PCR的方法获得PPE19基因,并将其克隆到pGEX-kg载体中,转化大肠杆菌DH5α,挑取阳性菌落进行质粒的酶切和序列分析；将构建正确的克隆进行诱导表达,对菌体裂解物进行SDS-PAGE分析；用western-blot鉴定融合蛋白的表达.结果 正确构建了pGEX-PPE19原核表达载体,载体上基因序列正确；载体能在大肠杆菌中表达分子量约为70 kDa的重组蛋白；该蛋白能与GST抗体结合.结论 成功构建了GST-PPE19融合蛋白的表达载体,为进一步进行PPE19蛋白的功能研究奠定了基础.

关键词：结核分枝杆菌、PPE19、GST融合蛋白、表达与鉴定

所属期刊栏目：17

分类号：R5 ;R3

资助基金：国家重大传染病专项基金资助项目基金2008ZX10003-012

在线出版日期：2012-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：77-79