结核分枝杆菌CFP10-ESAT6-Rv3425基因片段融合蛋白的表达与纯化

摘要：

目的 克隆表达结核分枝杆菌CFP10-ESAT6-Rv3425基因片段融合蛋白并纯化,测抗原的免疫原性,为结核病的临床诊断提供有效的候选抗原.方法利用生物信息学分析免疫优势位点,设计不同引物,采用聚合酶链反应( Polymerase Chain Reaction,PCR)扩增出相应基因片段,插入pET30a表达载体,转入大肠杆菌BL21( DE3),IPTG诱导表达目的蛋白,亲和纯化后用H37Rv免疫的兔血清进行间接酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）测定其免疫原性.结果PCR扩增的CFP10、ESAT6和Rv33425基因片段与基因文库(Genbank)报道的完全一致.三者在大肠杆菌BL21(DE3)中融合表达的产物约为22kDa,与预计大小相吻合.Ni-NTA亲和纯化出目的蛋白.ELISA显示该蛋白具有较强的免疫原性.结论结核分枝杆菌CFP10-ESAT6-Rv3425融合基因片段的融合表达纯化后,可作为结核病免疫诊断的一个候选抗原.

关键词：分枝杆菌、结核、Rv3425、CFP10、ESAT6

所属期刊栏目：16

分类号：R39;R37

资助基金：国家科技重大专项2008ZX10003003

在线出版日期：2011-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1533-1535