二甲双胍抑制下咽癌裸鼠移植瘤生长的实验研究

摘要：

目的:通过构建下咽癌裸鼠移植瘤模型,研究二甲双胍对下咽癌体内生长的抑制作用及临床上治疗下咽癌的理论基础.方法:人下咽癌Fadu细胞悬液皮下接种法构建荷瘤鼠,接种2周后取皮下移植瘤块接种至裸鼠腋背部皮下,建立移植瘤动物模型.当移植瘤体积增大到约60 mm3时,选取15只瘤块较均匀的裸鼠,随机均分为3组,分别为对照组(等体积的生理盐水)、低剂量二甲双胍治疗组”met40组,40 mg/(kg·d)”和高剂量二甲双胍治疗组”(met200组,200mg/(kg·d)”,连续28 d每日腹腔注射给药1次,每天观察裸鼠的一般情况.治疗28 d后,脱颈处死荷瘤鼠,取移植瘤,以免疫组织化学染色及Western Blot方法检测各组移植瘤内AMPK、p21、cyclin D1的表达情况.结果:①以Fadu细胞瘤块接种于裸鼠腋背部皮下,成功构建了下咽癌裸鼠移植瘤模型,在药物干预全程中,各组裸鼠一般情况良好,无特殊异常表现及药物不良反应发生;②药物干预28 d后,2个二甲双胍治疗组的移植瘤平均体积均较对照组有显著抑制(P＜0.05),met40组和met200组的抑瘤率分别为(23.30±7.17)％和(40.51±9.25)％;③移植瘤标本免疫组织化学染色结果显示,肿瘤内AMPK和p21蛋白的阳性表达平均吸收度值:met40组为0.262±0.046和0.305±0.091,met200组为0.308±0.087和0.477±0.114,均显著高于对照组(0.246±0.038和0.288±0.065),差异有统计学意义(P＜0.05);cyclin D1蛋白阳性表达平均吸收度值:met40组为0.269士0.042,met200组为0.216±0.032,显著低于对照组(0.307±0.060),差异有统计学意义(P＜0.05);④Western Blot方法检测AMPK和p21蛋白的灰度值结果显示:AMPK和p21蛋白met40组分别为1.124±0.085和0.594±0.063,met200组为1.783±0.128和0.970±0.079,均显著高于对照组(0.641±0.042和0.474±0.027),差异有统计学意义(P＜0.05);cyclin D1蛋白met40组为0.781±0.055,met200组为0.711±0.046,显著低于对照组(1.608±0.101),差异有统计学意义(P＜0.05).结论:40 mg/(kg·d)和200mg/(kg·d)浓度的二甲双胍均可有效抑制下咽癌裸鼠移植瘤模型的生长,抑制肿瘤细胞的增殖、促进其凋亡,且没有引起明显的不良反应,提示二甲双胍对于下咽癌患者的治疗具有较好的临床应用前景.

关键词：二甲双胍、下咽肿瘤、细胞周期、凋亡、腺苷酸活化蛋白激酶、p21、cyclin D1

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分类号：R765.21(耳鼻咽喉科学)

资助基金：河北省卫生厅医学科学研究重点课题计划项目No:1120140041

在线出版日期：2016-12-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1680-1684