10.3969/j.issn.1001-1781.2011.20.009
干扰hTERT基因慢病毒载体对人鼻咽癌细胞的生长抑制作用
目的:本课题利用RNA干扰(RNAi)技术,研究短发夹RNA (siRNA)抑制人端粒酶逆转录酶( hTERT)基因表达对鼻咽癌细胞生长的抑制作用.方法:根据hTERT cDNA序列构建表达hTERT mRNA的特异的、含荧光素基因的真核表达载体,包装成慢病毒.实时定量PCR及Western blot分析染细胞hTERT mRNA及蛋白表达水平.MTT实验检测转染细胞的体外增殖速度.流式细胞仪检测细胞的生长周期.体外细胞侵袭实验检测比较各组的侵袭能力.结果:RT-PCR和Western blot检测显示,hTERT siRNA能显著下调hTERT mRNA和蛋白水平,尤其hTERT siRNA1,siRNA处理后的肿瘤细胞增殖受到抑制,细胞迁移、侵袭能力也显著降低.siRNA组和空病毒组(NC组)分别与空白细胞组(control组)之间比较,siRNA组与control组瘤细胞生长差异有统计学意义(P<0.01),NC组与control组之间瘤细胞生长差异无统计学意义(P>0.05).结论:慢病毒载体沉默hTERT基因可以显著抑制鼻咽癌细胞的生长;hTERT siRNA可有效抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭;提示hTERT可能成为抑制鼻咽癌细胞增殖和转移的新的分子靶点.
鼻咽肿瘤、人端粒酶逆转录酶、肿瘤、鳞状细胞、慢病毒、基因沉默
25
R739.63(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目30973300
2012-02-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
939-943