慢病毒介导的siRNA沉默MRP4基因增强急性髓系白血病对阿霉素的敏感性

摘要：

化疗是急性髓系白血病的标准治疗手段,然而白血病细胞多药耐药的产生为白血病化疗的主要障碍.在耐阿霉素的K562细胞株(K562/ADR)中,MRP4表达较不耐药的K562细胞株明显增高.本研究试图运用慢病毒介导的siRNA沉默MRP4基因后研究能否增强K562/ADR对阿霉素的敏感性.首先设计并构建了5个针对MRP4基因的慢病毒介导的siRNA (Iv-shRNAs-MRP4);随后用荧光显微镜观察1v-shRNA-MRP4感染K562/ADR细胞的感染效率;用real-time PCR及Western blot检测感染1v-shRNA-MRP4后K562/ADR细胞MRP4 mRNA及蛋白表达;应用MTS法及流式细胞术检测感染1v-shRNAs-MRP4后K562/ADR细胞增殖活性及凋亡.荧光显微镜观察结果可见,K562/ADR细胞1v-shRNA-MRP4感染效率达到80％以上;相比较其他1v-shRNAs-MRP4,1v-shRNAI-MRP4对MRP4基因沉默效应最强;在K562/ADR细胞中Iv-shRNA1-MRP4组mRNA及蛋白表达均较对照组明显受抑；联合1v-shRNA1-MRP4与阿霉素后K562/ADR细胞生长受抑且细胞凋亡增加.上述结果提示,MRP4基因可能参与了K562/ADR细胞株多药耐药机制,慢病毒介导的siRNA沉默MRP4基因可增强急性髓系白血病对阿霉素的敏感性.

关键词：急性髓系白血病、慢病毒、siRNA、MRP4、K562/ADR

所属期刊栏目：58

分类号：R733.71(肿瘤学)

资助基金：甘肃省科技厅自然科学基金资助项目20090501

在线出版日期：2012-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2865-2872