强MAR的分离及其体内外功能鉴定

摘要：

将MAR(matrix attachment region)构建到外源基因表达盒两侧可以促进外源基因的表达克服基因沉默. 用PCR方法从烟草和拟南芥中分离到4个新的MAR序列(TM2, TM3, AM1和AM2), 以水稻悬浮细胞为材料, 提取大量细胞核制备核基质, 以已发表的MAR(TM1)为对照, 对4个新MARs序列进行体外结合实验. 结果表明TM2和TM3与核基质的结合能力强于已知MAR序列. 将4个新MARs和对照分别顺向构建到表达载体pBI121 gus基因表达盒两侧, 用农杆菌介导法转化烟草, 获得转基因植株. 对转基因植株体内GUS酶活性检测表明, TM1, TM2, TM3和AM1均能使外源基因表达增强, 其中TM2 增强5倍, TM1增强1.5倍, TM2增强效果强于对照 TM1. 表明分离到一个新的强MAR, 可以用于高效表达载体的构建. 对5个MARs的序列特征、体外结合能力及外源基因表达影响三者之间的关系进行了分析, 并对获得的强MAR在植物基因工程中的应用进行了讨论.

关键词：MAR分离、核基质、体外结合、β-葡糖醛酸酶、外源基因表达、高效表达载体构建

所属期刊栏目：47

分类号：Q94(植物学)

资助基金：国家转基因植物研究和产业化专项基金J99-A-038;国家自然科学基金39970075

在线出版日期：2004-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1572-1577