趋化素样因子1对肾癌细胞ACHN生物活性的影响及其相关机制

摘要：

多项研究发现,趋化素样因子1(chemokine-like factor1,CKLF1)是人类多种肿瘤发生和进展的重要调节因子.然而,关于CKLF1对肾癌细胞生物活性的影响知之甚少.通过质粒转染实现CKLF1在肾癌细胞ACHN中过表达,探究CKLF1对肾癌细胞ACHN细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.将实验组pEGFP-N1-CKLF1和对照组pEGFP-N1真核细胞表达质粒分别转染肾癌ACHN细胞,实现趋化素样因子1在ACHN细胞中的过表达.利用荧光显微镜,镜下观察质粒转染效率.利用细胞计数试剂盒8(cell counting Kit-8,CCK8)观察肾癌细胞ACHN转染24、48、72 h后增殖情况;利用流式细胞术检测ACHN细胞转染24、48、72 h后细胞周期的变化情况;利用Hoechst33258染色法观察转染48 h后,ACHN细胞形态变化,利用流式细胞术检测各组细胞凋亡率.采用Western blot法检测CKLF1过表达后,细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、Bcl-2样蛋白1(Bcl-2 like 1,Bcl-xL)、信号传导及转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)、磷酸化信号传导及转录激活因子3(phosphorylation signal transducers and activators of transcription 3,P-STAT3)表达情况.研究结果显示:荧光显微镜下90％以上的细胞有绿色荧光蛋白表达,证明转染效率良好.CCK8检测结果显示:转染48、72 h后,实验组肾癌细胞ACHN的增殖情况均明显高于对照组,差异有显著性意义48 h(P<0.05),72 h(P<0.05);流式细胞术检测结果显示:实验组增值指数PI明显高于对照组,差异有显著性意义24 h(P<0.01),48 h(P<0.01),72 h(P<0.01).荧光显微镜下Hoechst染色结果显示:与对照组相比较,实验组凋亡小体数量较少.流式细胞术检测结果显示,与对照组相比较,转染后48 h后实验组细胞凋亡率明显降低(P<0.05).Western blot结果:与对照组相比较,周期相关蛋白Cyclin D1表达明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);实验组凋亡相关蛋白Bcl-xL表达量明显高于对照组(P<0.05);实验组JAK激酶(Janus kinase,JAK/STAT3,JAK-STAT3)信号通路蛋白P-STAT3明显高于对照组(P<0.05).趋化素样因子1过表达可促进肾癌细胞ACHN的增殖、抑制其凋亡,其发生机制可能与JAK-STAT3信号通路有关.CKLF1可能是肾透明细胞癌的新的治疗靶点.

关键词：肾癌、趋化素样因子1、凋亡

所属期刊栏目：22

分类号：R737.11(肿瘤学)

资助基金：内蒙古自治区高校科学技术研究项目;内蒙古自治区肿瘤生物治疗协同创新项目;内蒙古自治区自然科学基金项目;内蒙古自治区卫生健康科技计划

在线出版日期：2023-02-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：15088-15094