3-酮基嘌呤还原酶(TSC10)基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达

摘要：

TSC10基因所编码的3-酮基嘌呤还原酶是酵母中神经酰胺合成的重要因子.设计了一种从酵母中提取神经酰胺经济、便捷、高效的方法:①利用构建含有TSC10基因的毕赤酵母GS115表达载体pPIC3.5K-TSC10;②电转化法将该表达质粒转化到GS115感受态细胞中;③用G418筛选以及PCR鉴定;④使用qRT-PCR和SDS-PAGE进行检测.结果经过G418筛选以及PCR鉴定后确定获得了包含TSC10基因的毕赤酵母转化子,经过qRT-PCR和SDS-PAGE进行检测后发现TSC10基因在20个阳性菌株中均可以稳定、高效表达.成功构建了3-酮基嘌呤还原酶高表达的毕赤酵母菌株,并为后续获得高收率神经酰胺奠定了基础.

关键词：3-酮基嘌呤还原酶、毕赤酵母、基因表达

所属期刊栏目：18

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：吉林省中药组学工程实验室建设项目2014N155

在线出版日期：2018-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：31-34