慢病毒介导的 HTRA1突变基因感染对人脑血管平滑肌细胞内氧化应激反应的影响

摘要：

检测HTRA1及HTRA1－Mut基因慢病毒载体转染HBVSMC后， HBVSMC内氧化应激水平的变化。以HTRA1及HTRA1－Mut基因慢病毒载体转染HBVSMC后，在特定的时间点收集NC、OE－WT HTRA1及OE－MU HTRA1三组细胞的总RNA及总蛋白，分别用RT－PCR和Western Blot的方法检测三组细胞的NOX4 mRNA及蛋白水平的表达情况；用DCFH－DA法检测三组细胞内的活性氧水平。从定量PCR结果可以看出，人脑血管平滑肌细胞中， OE－MU组NOX4基因表达丰度是NC组的2．015倍。从Western blot结果可以看出，在正常的人脑血管平滑肌细胞中NOX4蛋白水平表达较低，而在慢病毒LV－HRTA1及LV－HRTA1－MUT感染后NOX4蛋白表达水平增高。在正常的人脑血管平滑肌细胞中ROS水平表达较低，而在慢病毒LV－HRTA1及LV－HRTA1－MUT感染后ROS蛋白表达水平增高，在突变型病毒感染细胞组表现更为明显。说明：①HTRA1突变型基因感染人脑血管平滑肌细胞后，细胞内活性氧产量增加，NOX4 mRNA水平的表达正常细胞升高，但较HTRA1野生型基因无明显差别；NOX4在蛋白水平表达较其他两组均升高；②HTRA1突变型基因感染的人脑血管平滑肌细胞出现增殖减少、迁移活力降低以及凋亡增加可能与细胞内的氧化应激有关，为进一步研究CARASIL发病机制奠定基础。

关键词：HTRA1、人脑血管平滑肌细胞、活性氧、NADPH、NOX4

所属期刊栏目：16

分类号：R743(神经病学与精神病学)

在线出版日期：2016-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：35-39,79