重组大肠杆菌利用乳糖自诱导系统融合表达天蚕素AD和蛙BuforinⅡ

摘要：

以包含质粒pET-Trx-CAD-BuforinⅡ的大肠杆菌BI21(DE3)为研究对象,开发了一种利用乳糖自诱导方式表达天蚕素AD和蛙BuforinⅡ的表达系统.首先,在LB培养基中研究了乳糖浓度、诱导时机和诱导时间对目的蛋白表达的影响.然后,利用“分解代谢物阻遏”原理构建乳糖自诱导表达系统,以“葡萄糖+主碳源”两种碳源的依次代谢将蛋白表达过程分为两个阶段:第一阶段为菌体生长阶段,菌体利用葡萄糖生长,乳糖无法进入细胞诱导蛋白表达;第二阶段为蛋白表达阶段,葡萄糖耗尽,菌体开始利用主碳源生长;同时乳糖进入细胞诱导蛋白表达.最后,利用优选的“葡萄糖+木糖”组合自诱导表达天蚕素AD和BuforinⅡ的融合蛋白,得到的目的蛋白占全菌总蛋白含量的45.2％.

关键词：大肠杆菌、乳糖、自诱导、天蚕素AD、BuforinⅡ、融合表达

所属期刊栏目：14

分类号：Q939.9(微生物学)

资助基金：山东省科技发展计划2011GSF12107、2009GG10009012;济南市科技计划项目-企业自主创新计划201201077

在线出版日期：2014-05-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：179-182