Daxx-C抗血清的制备与纯化及初步应用

摘要：

将含有Daxx-C端的融合蛋白6His-DM626-740纯化物免疫小鼠,分析抗血清效价并将其纯化,为进一步分析Daxx在人乳头瘤病毒16型(HPV16)阳性宫颈癌组织中的分布奠定基础.将6His-DM626-740纯化物以皮下多点注射和腹腔注射方式免疫接种4只8周龄雌性BALB/c小鼠,初次免疫3周后,加强免疫1次,以后每周加强免疫1次；共免疫4次.每次免疫前及末次免疫后7d取血,ELISA测定抗体效价.饱和硫酸铵盐析沉淀法初步纯化抗血清,并用Western blot检测之.培养Caski细胞,利用间接免疫荧光试验观察Daxx在细胞中的分布与定位.纯化物免疫小鼠后,制备的Daxx-C多克隆抗体效价为1∶6 400.纯化的抗血清能够与IPTG诱导表达的6His-DM626-740及其纯化物发生结合反应.在Caski细胞,显绿色信号的Daxx主要分布于胞浆,少数分布于胞核且在核膜附近荧光较强,呈区域性聚集.6His-DM626-740纯化物具有良好的免疫原性；纯化的抗血清可用来检测细胞中的Daxx.

关键词：Daxx、抗血清、纯化

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分类号：Q518.1(蛋白质)

资助基金：湖南省教育厅重点项目11A102;湖南省教育厅一般项目12C0337;湖南省卫生厅课题B2011-043

在线出版日期：2013-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：8259-8262