利用经修饰的survivin短肽体外诱导对胃癌细胞系具有限制性杀伤作用的特异性细胞毒性T细胞

摘要：

采用一种简单有效的方法体外诱导经修饰的survivin短肽特异性细胞毒性T细胞,并观察其对胃癌细胞的杀伤作用.选取对HLA-A2分子亲和力更高的survivin短肽(96-104,LLLGEFLKL,HLA-A2限制性)以更有效地诱导特异性T细胞.选取正常志愿者外周血单核细胞,筛选其中HLA-A2+者,利用HLA-A2/survivin短肽有效诱导特异性细胞毒性T细胞.Pentamer实验检测特异性细胞毒性T细胞比率.Elispot实验检测细胞毒性T细胞IFN-γ分泌能力.选取胃癌细胞系MKN28、SGC7901及KATO Ⅲ,检测其HLA-A2和survivin表达情况.检测特异性细胞毒性T细胞对三种细胞系的杀伤效果.Pentamer实验结果显示,HLA-A2/survivin短肽刺激之前短肽/HLA Pentamer和CD8双阳性细胞仅为0.06％,接受刺激后双阳性细胞增加到27.5％.Elispot实验结果显示HLA-A2/survivin短肽刺激后IFN-γ分泌细胞比率明显强于阴性对照组.PCR结果显示,KATO Ⅲ为HLA-A2+,MKN28和SGC7901为HLA-A2-.Western Blotting结果显示KATO Ⅲ和SGC7901为survivin阳性,MKN28为survivin阴性.特异性细胞毒性T细胞杀伤结果显示,细胞能有效杀伤KATO Ⅲ细胞,但对其他两种细胞杀伤效果不明显.p ＜0.01.经修饰的survivin短肽能够有效诱导特异性细胞毒性T细胞,并对胃癌细胞系有HLA-A2/survivin限制性杀伤.

关键词：survivin、经修饰肽段、HLA-A2、外周血单核细胞、特异性细胞毒性T细胞、胃癌细胞系

所属期刊栏目：12

分类号：R392.12

资助基金：国家自然科学基金81070799

在线出版日期：2013-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：9461-9465