贴壁及悬浮培养的Trex-293细胞生长及其重组腺病毒制备产率的比较分析

摘要：

为了提高病毒产率并避免制备的重组腺病毒产物中残留的动物血清,将贴壁生长的Trex-293细胞用无动物血清的CD293培养基在搅拌式培养瓶中悬浮培养.分析比较其生长特征及不同条件下的病毒产率.结果表明悬浮培养的细胞生长为稳定状态的时间比贴壁培养时稍长,但每次以(4-6)×105 cells/mL密度传代.(3-4)d后基本达到2×106 cells/mL,21 d达3×106 cells/mL以上,比贴壁细胞密度约高3倍.培养初期,悬浮细胞存活率稍低,培养14 d开始维持90％以上,细胞倍增时间约32 h.而贴壁细胞存活率是基本维持在95％以上.重组腺病毒以200,500和1000 VP/cell的比例感染悬浮细胞所获产率均值各为18000,14000和990 VP/cell,而1000 VP/cell的比例感染贴壁细胞所获产率均值为10500 VP/cell.结论为Trex-293细胞用无动物血清的培养基在搅拌式培养瓶中可悬浮培养,当重组腺病毒感染比例为200 VP/cell,感染后48 h,细胞存活率50％时收获有利于提高病毒产率,且高于感染贴壁细胞所获产率.

关键词：重组腺病毒产率、Trex-293、搅拌式培养瓶(Spinner Flask)、悬浮培养

所属期刊栏目：12

分类号：Q253;Q291(细胞生理学)

在线出版日期：2013-01-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：8637-8641