结核分枝杆菌Hsp16.3单克隆抗体的制备及其特性鉴定

摘要：

制备抗结核分枝杆菌Hsp16.3的单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定.将含目的基因的表达载体pProEXHTb -Hsp16.3,通过E.coli DH5α诱导表达,获得含有6×His的Hsp16.3蛋白,采用Ni - NTA纯化试剂盒进行目的蛋白的纯化,并用透析方法进行蛋白复性.将复性的蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术进行细胞融合,间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞株.将获得的Hsp16.3阳性杂交瘤细胞株分别利用间接ELISA法和Western blot方法进行效价、相对亲和力及特异性的测定.获得了三株Hsp16.3的单克隆抗体,分别命名为3H6F9、1D5E1和4H8G6,其效价分别为1∶1×10 7、1∶1×106和1∶1×106,相对亲和力分别为0.000 1 mg/mL、0.001 mg/mL和0.001 mg/mL,并且无交叉反应性.所获得的结核分枝杆菌Hsp16.3的单克隆抗体效价高、特异性强,为进一步研究Hsp16.3在结核分枝杆菌潜伏感染中的作用提供了有效的工具.

关键词：结核分枝杆菌、Hsp16.3、单克隆抗体

所属期刊栏目：12

分类号：R521(结核病)

资助基金：国家自然科学基金30972767;陕西省自然科学基金2010JM4012

在线出版日期：2012-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：30-33