10.3969/j.issn.1671-1815.2011.18.003
CUEDC2突变体的构建及在原核和昆虫表达系统中的表达
为构建CUEDC2的突变体并在原核和昆虫表达系统中表达验证,根据人cuedc2序列设计引物,以其突变体质粒为模板PCR扩增目的片段,酶切后连接至pET28a原核表达载体以及pFastBac1-Flag-N和pFastBac-HTA昆虫表达系统的表达载体.转化至DH5α后提取质粒,经菌液PCR、测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3)及DH10Bac感受态细胞中.原核表达载体在E.coli中表达后用Ni-NTA亲和纯化,SDS-PAGE检测.昆虫表达载体提取杆粒,转染至昆虫细胞Sf9中表达.最后用western进行鉴定.结果成功构建了CUEDC2的突变体,并在原核和昆虫表达系统中表达.说明在原核和昆虫表达系统中,成功表达的CUEDC2突变体蛋白为CUEDC2的结构和功能研究奠定了基础.
CUEDC2、表达、昆虫、突变体
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Q319.34(遗传与变异)
国家自然科学基金30871234
2011-10-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
4132-4135,4138