羊布鲁菌外膜蛋白Omp25d的原核表达、鉴定及纯化

摘要：

研究羊布鲁菌外膜蛋白 Omp25d 基因的克隆,原核表达,以及纯化,根据羊布鲁菌 M5株外膜蛋白 Omp25d 蛋白基因序列设计引物,扩增出大小约为650 bp 的目的基因片断,克隆入融合表达载体 pGEX-4T-1,构建重组质粒 pGEX-4T-1-Omp25d.在大肠杆菌中将该蛋白表达并用亲和层析法纯化.用 Western-blot 分析方法鉴定GST-Omp25d 蛋白.结果成功地构建了 pGEX-4T-1-Omp25d 原核表达载体并在大肠杆菌中表达了 Omp25d 基因,纯化后所获得的融合蛋白与兔抗布鲁菌血清发生特异性反应.表明研究成功构建了pGEX-4T-1-Omp25d元和表达载体,并且在大肠杆菌中进行表达,纯化的融合蛋白具有良好的免疫原性.

关键词：羊布鲁菌、Omp25d蛋白、克隆、表达、纯化

所属期刊栏目：10

分类号：R378.5(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：军队科技攻关项目06G091;国家自然科学基金30901281

在线出版日期：2010-11-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：6146-6149,6154